2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、Merlin(NF2)蛋白是由NF2基因編碼的69kDa蛋白,是一種腫瘤抑制因子。Merlin與Ezrin/Radixin/Moesin(ERM)蛋白家族具有高度的序列同源性,結(jié)構(gòu)上也包含N端FERM結(jié)構(gòu)域、中間的a-helical結(jié)構(gòu)域和C端結(jié)構(gòu)域。與ERM家族成員相似,Merlin通過分子內(nèi)N端和C端相互作用的調(diào)節(jié)使其分子構(gòu)象有更伸展和緊密兩種狀態(tài)間的變化,且N端與C端的相互作用可通過分子內(nèi)氨基酸殘基的磷酸化修飾進(jìn)行調(diào)節(jié)。Merli

2、n與Ezrin、Radixin、Moesin相似,分子構(gòu)象處于更伸展的“展開”狀態(tài)時(shí),釋放出N端的FERM結(jié)構(gòu)域與許多效應(yīng)因子相互作用。
   細(xì)胞之間的接觸抑制對(duì)于組織發(fā)生過程很重要,這個(gè)過程的破壞常常導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。Merlin通過分子構(gòu)象“展開”和“閉合”的調(diào)控,在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中與不同的效應(yīng)因子相互作用調(diào)控細(xì)胞增殖信號(hào),從而不至于因細(xì)胞的過度增殖而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。與更緊密的“閉合”構(gòu)象相比,Merlin分子處于更伸展的“展開

3、”構(gòu)象時(shí)起到更好的增殖抑制功能。但Merlin的結(jié)構(gòu)及構(gòu)象調(diào)節(jié)的分子機(jī)制目前還不清楚。
   本論文中,通過蛋白表達(dá)、親和層析、離子交換層析和分子排阻色譜法純化得到野生型和幾種點(diǎn)突變Merlin重組蛋白;N端FERM結(jié)構(gòu)域;帶有不同點(diǎn)突變的C端結(jié)構(gòu)域以及其他一些可以和Merlin相互作用的重組蛋白。利用isothermal titration calorimetry(ITC)和分析型超速離心(AUC)等方法,發(fā)現(xiàn)Merlin分子

4、內(nèi)N端FERM結(jié)構(gòu)域和C端結(jié)構(gòu)域存在相互作用,但在野生型狀態(tài)下,分子內(nèi)的相互作用不足夠的強(qiáng)而使分子構(gòu)象在更伸展的“展開”和更緊密的“閉合”之間擺動(dòng)。分子內(nèi)絲氨酸殘基磷酸化修飾加強(qiáng)了分子內(nèi)的這種相互作用而使分子處于更緊密的構(gòu)象而削弱了許多分子間相互作用。最終獲得了一種構(gòu)象更為緊密的突變體。利用結(jié)晶試劑盒獲得了這種含有這些點(diǎn)突變的N端FERM和C端結(jié)構(gòu)域復(fù)合物的晶體并進(jìn)行了晶體優(yōu)化。期望優(yōu)化后的晶體,能通過X射線衍射收集數(shù)據(jù),解析Merli

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