脂質(zhì)體介導(dǎo)的TK-GCV系統(tǒng)聯(lián)合多柔比星對(duì)骨肉瘤細(xì)胞體外殺傷作用研究.pdf

1、目的：
　　 研究脂質(zhì)體介導(dǎo)的TK/GCV系統(tǒng)聯(lián)合普通化療用于治療骨肉瘤細(xì)胞的可行性。初步研究GCV聯(lián)合常用化療藥物多柔比星對(duì)骨肉瘤mg-63細(xì)胞的殺傷作用。
　　 方法：
　　 構(gòu)建重組質(zhì)粒pIRES-EGFP-tk，培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染骨肉瘤細(xì)胞株mg-63，流式細(xì)胞儀分析和熒光倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，篩選穩(wěn)定細(xì)胞系，MTT法檢測(cè)GCV與不同濃度多柔比星聯(lián)合應(yīng)用對(duì)mg-63的殺傷作用。
　　 結(jié)果：

2、>　　 1.成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pIRES-EGFP-tk并將tk導(dǎo)入mg-63，獲得穩(wěn)定表達(dá)。
　　 2.熒光顯微鏡下觀察mg-63(TK+)呈現(xiàn)綠色熒光。
　　 3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染率在61％。
　　 4.GCV(10μg/ml)可明顯抑制mg-63(tk+)的生長，多柔比星最低有效濃度為(1μg/ml)；聯(lián)合應(yīng)用GCVμg/ml與多柔比星0.25μg/ml對(duì)mg-63(tk+)時(shí)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞株有明顯殺傷作用

3、。
　　 結(jié)論：
　　 通過本實(shí)驗(yàn)觀察脂質(zhì)體介導(dǎo)的TK/GCV系統(tǒng)與普通化療藥物多柔比星聯(lián)合應(yīng)用對(duì)骨肉瘤細(xì)胞生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在GCV為5μg/ml時(shí)（小于其有效殺傷濃度），低濃度多柔比星(0.25μg/ml)即能表現(xiàn)出對(duì)mg-63細(xì)胞生長明顯的抑制作用。與單用多柔比星相比，其對(duì)mg-63細(xì)胞的有效殺傷濃度降低了4倍。這可以有效減低多柔比星的使用劑量，降低起其毒副作用。其具體原因可能與兩種藥物不同的作用機(jī)制有關(guān)。GCV