Wistar大鼠后肢缺血模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：動物缺血模型是研究血管再生、缺血性疾病發(fā)病機(jī)理和治療等許多研究的基礎(chǔ)。其中，肢體缺血模型因與下肢動脈硬化或栓塞等常見病的治療研究有關(guān)而應(yīng)用極為廣泛。特別是近年來，通過建立動物后肢缺血模型進(jìn)行干細(xì)胞移植來促進(jìn)下肢血管再生已成為新的趨勢。在與此相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究中，成功建立一種效果確切、可重復(fù)性強(qiáng)的肢體缺血模型是保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行的關(guān)鍵。縱覽相關(guān)文獻(xiàn)，我們發(fā)現(xiàn)，長期以來雖然國內(nèi)外為數(shù)眾多的研究者曾運(yùn)用各種不同的方法建立后肢缺血模

2、型，但文獻(xiàn)中對于后肢缺血模型的確切效果等重要情況缺乏詳細(xì)的敘述，且說法不一，迄今未能形成統(tǒng)一結(jié)論。 在本文中，我們力圖對下肢缺血模型的效果和可重復(fù)性進(jìn)行詳細(xì)的研究。首先采用常規(guī)血管結(jié)扎法制作Wistar大鼠后肢缺血模型，觀察其效果；其次，采用局部血管結(jié)扎結(jié)合主動脈灌注示蹤的辦法研究Wistar大鼠后肢血管吻合情況；在探討分析常規(guī)血管結(jié)扎法制作大鼠后肢缺血模型的不利因素的基礎(chǔ)上，采用白及栓塞法制作Wistar大鼠后肢缺血模型，以期

3、找到一種可靠且有效的新方法。 第一部分： 常規(guī)結(jié)扎法制作Wistar大鼠后肢缺血模型效果探討目的：研究結(jié)扎血管法制作大鼠后肢缺血模型的效果。 方法：手術(shù)分離并結(jié)扎切斷大鼠后肢的不同血管，采用病理切片等手段，研究大鼠后肢是否發(fā)生了缺血。 結(jié)果：結(jié)扎前后大鼠后肢未出現(xiàn)明顯的變化。 結(jié)論： 1.分別結(jié)扎并切斷大鼠的股淺動脈、股動脈、髂外動脈及髂總動脈后，大鼠后肢均未出現(xiàn)明顯的缺血表現(xiàn)；

4、2.大鼠后肢有髂內(nèi)動脈系和髂外動脈-股動脈系兩個供血來源，可能是結(jié)扎失敗的原因之一； 3.用上述原因仍然無法解釋結(jié)扎髂總動脈后的表現(xiàn)，提示還有另外的影響因素。 第二部分： Wistar大鼠后肢血管吻合示蹤研究 目的：采用局部血管結(jié)扎結(jié)合主動脈灌注示蹤的辦法研究大鼠后肢血管吻合情況。 方法：分為正常組、切斷股動脈組和切斷髂總動脈三天組，分別用普魯士藍(lán)-氯仿溶液經(jīng)大鼠主動脈進(jìn)行血管灌注，觀察大鼠后肢的

5、血管顯示情況。 結(jié)果：灌注結(jié)果表明大鼠后肢在切斷供血動脈后仍然有普魯士藍(lán)-氯仿溶液通過。 結(jié)論： 1.大鼠后肢存在豐富的動脈吻合：動脈吻合存在于雙后肢之間和一側(cè)后肢不同部位之間； 2.大鼠后肢在切斷供血動脈后仍能繼續(xù)得到血液供應(yīng)； 3.結(jié)合第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們認(rèn)為，采用結(jié)扎手段難以制作出可靠的大鼠后肢缺血模型，需要另外尋找新的方法。 第三部分： 白及栓塞法制作Wistar大鼠后肢

6、缺血模型 目的：研究白及栓塞法制作大鼠后肢缺血模型的可行性及其效果。 方法：使用經(jīng)超微粉碎的、直徑300目47μm的白及微粒以及其它常用栓塞劑如碘油等從股動脈注入栓塞大鼠后肢的血管，并采用病理切片及其它手段觀察大鼠后肢的變化情況。 結(jié)果：與其它栓塞劑相比，大鼠后肢在使用白及栓塞后出現(xiàn)了更加明顯的缺血表現(xiàn)。 結(jié)論： 1.使用白及微粒栓塞大鼠后肢的血管后，大鼠后肢發(fā)生了嚴(yán)重的慢性持續(xù)性缺血；