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文檔簡介
1、研究背景:
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種典型的波及全身多個系統(tǒng)和以及多個器官,臨床表現(xiàn)復雜,以大量自身抗體產生、補體激活和免疫復合物沉積為主要特征的自身免疫性結締組織病。該病的發(fā)病人群有性別和年齡趨勢,發(fā)病率男女性別比約為1∶9且好發(fā)于育齡期女性。迄今為止,導致SLE免疫異常的病因以及發(fā)病機制仍不明確。在SLE中,由于T/B細胞等免疫細胞自我耐受狀態(tài)被破壞以及產生大量
2、的自身抗體從而造成全身性或局部的組織損傷和器官損害。因此了解自我耐受狀態(tài)被破壞和自身抗體產生的內在機理成為了研究的重點。而細胞內活性氧(reactive oxygen species,ROS)代謝失衡引起的細胞凋亡的紊亂是生成自身抗體的重要來源,也是體液免疫和細胞免疫失調的主要原因。因此,研究SLE病人和對照T/B細胞中ROS表達水平的變化對進一步闡述SLE發(fā)病機制有重要的意義。
目的:
分別對SLE病人和對照檢測其
3、ROS在外周血T/B細胞內的表達水平,并將其表達水平在包括各種主要的臨床表現(xiàn)及臨床實驗室指標的不同組間進行比較,包括SLE患者以及健康對照組;依據(jù)SLE疾病活動度評定的活動期SLE患者和穩(wěn)定期SLE患者;有狼瘡性腎炎和未并發(fā)狼瘡性腎炎組;抗-RNP抗體陽性組和抗-RNP抗體陰性組等,為進一步闡述疾病的發(fā)病機制和改善治療方法提供科學依據(jù)。
方法:
本實驗所用的血液樣本取自于安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院和安徽醫(yī)科大學第一附屬
4、醫(yī)院。實驗共收集病例57例,對照30例。所有對照均為按照性別和年齡進行匹配的健康志愿者。實驗所用的調查問卷來自本課題組實驗室,是在參考SLE疾病活動性指數(shù)(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)量表及SLE的診斷及分類量表的基礎上自行設計而成。問卷包括了患者的一般流行病學情況、主要臨床指標以及實驗室指標。采用密度梯度離心法提取人外周血單個核細胞(periph
5、eral blood mononuclear cell,PBMC)。利用流式細胞儀(flow cytometry,F(xiàn)CM),以及FITC、PE、APC三染色法來檢測PBMCs T/B細胞內ROS表達水平。所有數(shù)據(jù)均由SPSS10.01軟件來進行統(tǒng)計分析。
結果
SLE患者組與健康對照組相比,其外周血 T細胞內ROS平均熒光強度(mean fluorescence intensity,MFI)增高,且差異有統(tǒng)計學意義(
6、Z=-5.02,P<0.001)。與T細胞上的表達相反,SLE患者B細胞內ROS的表達低于健康對照組(Z=-3.18,P=0.001)。在外周血T細胞上,SLE患者伴有狼瘡性腎炎組ROS表達水平高于非狼瘡性腎炎SLE患者,差異有統(tǒng)計學意義(Z=-2.02,P=0.044).但在外周血T細胞和B細胞內ROS的的表達水平與疾病活動度均無相關。同時,本研究也將各項重要的 SLE的臨床指標和實驗室指標與 ROS的表達水平之間的關系進行了進一步的
7、探討,研究結果表明:SLE病人T細胞內ROS的高表達與蛋白尿生成有關,抗核抗體和抗-RNP抗體高的SLE患者其ROS在B細胞內的表達水平均高于低抗核抗體和抗-RNP抗體SLE患者。除此之外,抗-dsDNA抗體陽性患者與抗-dsDNA抗體陰性患者相比,抗Sm抗體陽性患者與無抗Sm抗體陰性患者相比,抗-SSA抗體陽性患者與抗-SSA抗體陰性患者相比等其他實驗室指標和臨床指標在組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(均有P>0.05)。
結論:
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