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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景:
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種典型的波及全身多個(gè)系統(tǒng)和以及多個(gè)器官,臨床表現(xiàn)復(fù)雜,以大量自身抗體產(chǎn)生、補(bǔ)體激活和免疫復(fù)合物沉積為主要特征的自身免疫性結(jié)締組織病。該病的發(fā)病人群有性別和年齡趨勢(shì),發(fā)病率男女性別比約為1∶9且好發(fā)于育齡期女性。迄今為止,導(dǎo)致SLE免疫異常的病因以及發(fā)病機(jī)制仍不明確。在SLE中,由于T/B細(xì)胞等免疫細(xì)胞自我耐受狀態(tài)被破壞以及產(chǎn)生大量
2、的自身抗體從而造成全身性或局部的組織損傷和器官損害。因此了解自我耐受狀態(tài)被破壞和自身抗體產(chǎn)生的內(nèi)在機(jī)理成為了研究的重點(diǎn)。而細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)代謝失衡引起的細(xì)胞凋亡的紊亂是生成自身抗體的重要來源,也是體液免疫和細(xì)胞免疫失調(diào)的主要原因。因此,研究SLE病人和對(duì)照T/B細(xì)胞中ROS表達(dá)水平的變化對(duì)進(jìn)一步闡述SLE發(fā)病機(jī)制有重要的意義。
目的:
分別對(duì)SLE病人和對(duì)照檢測(cè)其
3、ROS在外周血T/B細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平,并將其表達(dá)水平在包括各種主要的臨床表現(xiàn)及臨床實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的不同組間進(jìn)行比較,包括SLE患者以及健康對(duì)照組;依據(jù)SLE疾病活動(dòng)度評(píng)定的活動(dòng)期SLE患者和穩(wěn)定期SLE患者;有狼瘡性腎炎和未并發(fā)狼瘡性腎炎組;抗-RNP抗體陽性組和抗-RNP抗體陰性組等,為進(jìn)一步闡述疾病的發(fā)病機(jī)制和改善治療方法提供科學(xué)依據(jù)。
方法:
本實(shí)驗(yàn)所用的血液樣本取自于安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院和安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬
4、醫(yī)院。實(shí)驗(yàn)共收集病例57例,對(duì)照30例。所有對(duì)照均為按照性別和年齡進(jìn)行匹配的健康志愿者。實(shí)驗(yàn)所用的調(diào)查問卷來自本課題組實(shí)驗(yàn)室,是在參考SLE疾病活動(dòng)性指數(shù)(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)量表及SLE的診斷及分類量表的基礎(chǔ)上自行設(shè)計(jì)而成。問卷包括了患者的一般流行病學(xué)情況、主要臨床指標(biāo)以及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。采用密度梯度離心法提取人外周血單個(gè)核細(xì)胞(periph
5、eral blood mononuclear cell,PBMC)。利用流式細(xì)胞儀(flow cytometry,F(xiàn)CM),以及FITC、PE、APC三染色法來檢測(cè)PBMCs T/B細(xì)胞內(nèi)ROS表達(dá)水平。所有數(shù)據(jù)均由SPSS10.01軟件來進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果
SLE患者組與健康對(duì)照組相比,其外周血 T細(xì)胞內(nèi)ROS平均熒光強(qiáng)度(mean fluorescence intensity,MFI)增高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(
6、Z=-5.02,P<0.001)。與T細(xì)胞上的表達(dá)相反,SLE患者B細(xì)胞內(nèi)ROS的表達(dá)低于健康對(duì)照組(Z=-3.18,P=0.001)。在外周血T細(xì)胞上,SLE患者伴有狼瘡性腎炎組ROS表達(dá)水平高于非狼瘡性腎炎SLE患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.02,P=0.044).但在外周血T細(xì)胞和B細(xì)胞內(nèi)ROS的的表達(dá)水平與疾病活動(dòng)度均無相關(guān)。同時(shí),本研究也將各項(xiàng)重要的 SLE的臨床指標(biāo)和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與 ROS的表達(dá)水平之間的關(guān)系進(jìn)行了進(jìn)一步的
7、探討,研究結(jié)果表明:SLE病人T細(xì)胞內(nèi)ROS的高表達(dá)與蛋白尿生成有關(guān),抗核抗體和抗-RNP抗體高的SLE患者其ROS在B細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平均高于低抗核抗體和抗-RNP抗體SLE患者。除此之外,抗-dsDNA抗體陽性患者與抗-dsDNA抗體陰性患者相比,抗Sm抗體陽性患者與無抗Sm抗體陰性患者相比,抗-SSA抗體陽性患者與抗-SSA抗體陰性患者相比等其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)和臨床指標(biāo)在組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均有P>0.05)。
結(jié)論:
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