軟骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外共培養(yǎng)的成瘤危險性的研究.pdf

1、目的:明確軟骨細(xì)胞和BMSCs共培養(yǎng)可構(gòu)建組織工程軟骨，探討共培養(yǎng)的種子細(xì)胞成瘤危險性。這對于明確軟骨細(xì)胞和BMSCs同時作為軟骨組織工程種子細(xì)胞的安全性具有重要意義，并為臨床應(yīng)用于治療軟骨損傷高齡患者提供理論基礎(chǔ)和實踐依據(jù)。
　　方法:
　　(1)軟骨細(xì)胞和BMSCs共培養(yǎng):
　　1)體外培養(yǎng)條件下獲得兔軟骨細(xì)胞及BMSCs，取第三代的軟骨細(xì)胞和BMSCs，分5組進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，分別是軟骨細(xì)胞組、BMSCs組、及2∶1

2、、1∶1、1∶2混合組，每組細(xì)胞總數(shù)相等。在體外培養(yǎng)兩周。
　　(2)軟骨細(xì)胞和BMSCs共培養(yǎng)后的自發(fā)腫瘤形成:
　　1)將軟骨細(xì)胞和BMSCs混合后體外長期共培養(yǎng)，檢測其c-myc的表達(dá)量;
　　2)檢測軟骨細(xì)胞和BMSCs共培養(yǎng)的上清液中VEGF的含量。
　　結(jié)果:
　　(1)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后可分化成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞;
　　(2)體外長期培養(yǎng)條件下，不同比例混合共培養(yǎng)的兔骨髓