肌萎縮側索硬化脊髓內源性神經前體細胞的變化及其調控因子HoxB表達改變的研究.pdf

1、目的:
　　采用G93A-SOD1轉基因小鼠作為肌萎縮側索硬化(ALS)動物模型,觀察分析正常生理條件下和ALS病理條件下成年小鼠脊髓神經前體細胞(NPCs)的分布、增殖、遷移途徑和分化方向以及HoxB9的表達情況。
　　方法:
　　構建 B6SJL-Tg(SOD1*G93A)1Gur/NJU轉基因小鼠動物模型,用 PCR技術檢測和篩選轉基因小鼠動物模型。采用熒光免疫組織化學雙標記技術,分別標記NPCs、神經元細胞、星

2、形膠質細胞、少突膠質細胞、HoxB9基因表達的細胞。每一解剖區(qū)同時進行雙重熒光免疫組織化學染色,在顯微鏡下觀察,并用圖像處理技術將不同染色的陽性細胞兩兩疊加成像,觀察分析陽性細胞分布特征,計算各種陽性細胞數。并統(tǒng)計分析相關解剖區(qū)NPCs、神經元細胞和神經膠質細胞的數量及HoxB基因家族表達細胞類型和表達量的變化。
　　結果:
　　1、正常成年小鼠脊髓組織內存在NPCs,并主要分布于中央管周圍區(qū)域,而在灰質區(qū)域內少量散在分布。

3、不同節(jié)段間中央管周圍區(qū)域的NPCs在數量上存在頸段>腰段>胸段的規(guī)律。
　　2、在ALS病理狀態(tài)下發(fā)病后的小鼠脊髓內存在NPCs的大量增殖,且在各個解剖區(qū)域均呈現出進展組>起病組>未發(fā)病組的規(guī)律。
　　3、在ALS病理狀態(tài)下小鼠脊髓灰質(灰質前角、后角、側角區(qū)域)內增殖的NPCs與Anti-GFAP antibody存在共免疫反應性。提示增殖的NPCs主要分化為星形膠質細胞。
　　4、在正常和ALS病理狀態(tài)下的小鼠脊髓