基于微透析取樣技術(shù)的氧化苦參堿大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)研究.pdf

1、氧化苦參堿廣泛存在于苦參、苦豆子、廣豆根中，是苦參的主要活性成分，具有明確的抗肝臟纖維化的作用。氧化苦參堿注射劑、片劑等獲得較為滿意的臨床療效，但注射劑半衰期短、給藥不便、易造成局部肌肉酸痛，因此研究熱點逐步轉(zhuǎn)向氧化苦參堿的經(jīng)皮給藥制劑。本研究利用微透析技術(shù)，對氧化苦參堿凝膠進(jìn)行了大鼠頸靜脈、肝臟、皮下三個部位的藥代動力學(xué)研究，并與大鼠尾靜脈血漿藥代動力學(xué)進(jìn)行比較，同時與大鼠股靜脈注射藥代動力學(xué)進(jìn)行比較。主要內(nèi)容有以下四個方面：1、體內(nèi)

2、分析方法的建立；2、微透析探針回收率的測定；3、靜脈注射大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)研究；4、凝膠劑處方的篩選；5、經(jīng)皮給藥大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)研究。
　　氧化苦參堿及其代謝物苦參堿的色譜條件采用梯度洗脫，色譜條件為Diamonsil C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm）；流動相為乙腈-0.1％磷酸（用三乙胺調(diào)pH至7.6-7.7），梯度洗脫；流速1.0 mL?min-1；檢測波長220 nm；柱溫35℃；進(jìn)樣量20μL。微透析

3、液中氧化苦參堿和苦參堿的線性范圍分別為0.20～50.30μg?mL-1、0.20～50.10μg?mL-1；血漿中氧化苦參堿和苦參堿的線性范圍分別為3.17～406.00μg?mL-1、0.32～40.90μg?mL-1。微透析液中氧化苦參堿和苦參堿的日內(nèi)、日間精密度（RSD）均小于7.7%，平均準(zhǔn)確度分別為95.9～101.3%、96.3～107.8%。血漿中氧化苦參堿和苦參堿的日內(nèi)、日間精密度（RSD）均小于10.7%，平均準(zhǔn)確度

4、分別為97.3～102.2%、97.2～105.0%，穩(wěn)定性良好。本方法準(zhǔn)確、簡單、專屬性強(qiáng)，適用于氧化苦參堿及其代謝產(chǎn)物苦參堿在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)研究中微透析液和血漿中藥物濃度的測定。
　　氧化苦參堿的探針回收率研究表明，探針回收率與藥物濃度（氧化苦參堿5.0、20.0、40.0μg·mL-1）無關(guān)，與灌流速度（1.0、2.0、3.0μL·min-1）成反比。相同流速下，同心圓、線性探針各自的體外正向、反向回收率相似，且體外回收

5、率均大于自身體內(nèi)反向回收率；同心圓探針的回收率大于線性探針（P<0.01）。體外正向透析法更準(zhǔn)確方便，1.0-3.0μL·min-1同心圓探針與線性探針的體外正向回收率在（61.71±1.62）%～（91.94±0.92）%、（38.13±2.73）%～（81.14±2.68）%，該回收率可作為藥物的探針回收率應(yīng)用于體內(nèi)藥代動力學(xué)研究中。
　　靜注藥代動力學(xué)結(jié)果表明，氧化苦參堿在大鼠體內(nèi)吸收、分布較迅速，半衰期較短，在體內(nèi)各部位藥

6、代動力學(xué)情況均符合二室開放模型，AUC和Cmax關(guān)系均基本呈現(xiàn)血漿＞血微透析＞肝臟微透析，這是由于藥物先進(jìn)入血再進(jìn)入肝臟代謝，且血微透析獲得的是游離態(tài)藥物濃度，而血漿獲得是包括游離態(tài)和蛋白結(jié)合態(tài)的總藥物濃度。低（40 mg·kg-1）、中（60 mg·kg-1）、高（80 mg·kg-1）劑量下，氧化苦參堿及其代謝產(chǎn)物苦參堿在大鼠體內(nèi)各部位的AUC呈增長趨勢，各部位AUC比值均沒有顯著性差異（P＞0.05）。
　　氧化苦參堿凝膠劑

7、體外處方篩選時，其生理鹽水溶液在7.93～1015.00μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=8942.323 X+2782.106(r=1.000，n=5)。凝膠最優(yōu)處方為14%氧化苦參堿+8%水性月桂氮?酮+5%丙二醇+5%薄荷油+7%羧甲基纖維素鈉，12 h累積滲透量平均值為（18.094±1.253） mg?cm-2，其滲透速率平均值為（1.418±0.122） mg?cm-2?h-1。凝膠經(jīng)皮給藥大鼠藥代動力學(xué)結(jié)

8、果表明，氧化苦參堿AUC呈現(xiàn)皮下微透析＞血漿＞血微透析＞肝臟微透析。氧化苦參堿經(jīng)皮給藥后，除皮下代謝產(chǎn)物苦參堿外，AUC和Cmax均隨著給藥面積的增加而升高。低（涂布面積為2 cm2，給藥量為0.5 g）、高（涂布面積為4 cm2，給藥量為1.0 g）劑量組下，氧化苦參堿血微透析AUC明顯高于肝臟微透析AUC，而代謝產(chǎn)物肝、血微透析的AUC相似。低劑量經(jīng)皮給藥已經(jīng)能達(dá)到80 mg·kg-1靜注的AUC。皮膚微透析結(jié)果顯示，氧化苦參堿經(jīng)過