中國(guó)蒼耳遺傳結(jié)構(gòu)的ISSR分析與茶樹(shù)體胚發(fā)生研究.pdf

1、本研究以我國(guó)15個(gè)省的16個(gè)野生蒼耳居群(含2個(gè)種和1個(gè)變種，即蒼耳、蒙古蒼耳和近無(wú)刺蒼耳)為材料，利用ISSR分子標(biāo)記進(jìn)行遺傳結(jié)構(gòu)分析；同時(shí)，還以茶樹(shù)“鐵觀音”品種幼胚為材料，對(duì)茶樹(shù)幼胚的直接體胚發(fā)生體系進(jìn)行初步的研究，并對(duì)體胚的發(fā)生過(guò)程進(jìn)行形態(tài)學(xué)和解剖學(xué)觀察。主要研究結(jié)果如下： 1．蒼耳居群遺傳結(jié)構(gòu)的ISSR分析根據(jù)蒼耳的特點(diǎn)，建立了蒼耳ISSR-PCR反應(yīng)體系。對(duì)16個(gè)居群的遺傳結(jié)構(gòu)ISSR分析，大致揭示了中國(guó)地區(qū)分布的野

2、生蒼耳遺傳多樣性。多樣性分析結(jié)果表明：全部樣本Shannon多樣性指數(shù)(I)平均值為0.0738，群體間的Shannon多樣性指數(shù)(I)為0.35；以居群廣西桂林的Shannon多樣性指數(shù)(I)為最高(0.2033)；基于基因頻率矩陣，利用平均觀察等位基因數(shù)(A)，平均有效等位基因數(shù)(Ae)和Nei基因多樣性指數(shù)(H)對(duì)16個(gè)野生蒼耳居群內(nèi)遺傳多樣性進(jìn)行評(píng)價(jià)，平均觀察等位基因數(shù)(A)與多態(tài)位點(diǎn)百分率(P)對(duì)16個(gè)野生蒼耳居群遺傳多樣性評(píng)

3、價(jià)結(jié)果是一致的；從整體上看，16個(gè)蒼耳屬野生資源的居群間遺傳多樣性與經(jīng)緯度不存在相關(guān)性，但大連(popl3)和海南(pop15)兩個(gè)居群的遺傳多樣性最低，應(yīng)該是與海島隔離有關(guān)。Genetic diversity(G<,ST>群體間雜和系數(shù))68.41％的變異基于居群間，而僅31.59％的變異存在于居群內(nèi)，群體間保持較高水平的分化。AMOVA分析結(jié)果進(jìn)一步表明了類似的情況，表明居群間具有一定水平的遺傳分化。并利用NTSYS。pc2-1軟件

4、對(duì)16個(gè)野生蒼耳居群進(jìn)行了聚類分析。同時(shí)研究了蒼耳屬植物居群的遺傳結(jié)構(gòu)與其品質(zhì)的關(guān)系，系統(tǒng)地論述了蒼耳屬植物居群的形態(tài)學(xué)變異、遺傳變異、化學(xué)成分變異的關(guān)系。為中藥蒼耳屬植物居群的品質(zhì)評(píng)價(jià)和資源利用提供了借鑒。 2．茶樹(shù)體胚發(fā)生研究以烏龍茶樹(shù)主栽品種“鐵觀音”為材料，建立了茶樹(shù)幼胚的愈傷組織誘導(dǎo)體系，以P7配方(0.05 mg/L2，4-D+3 mg/LBA)的愈傷誘導(dǎo)率最高；建立了茶樹(shù)的直接體胚發(fā)生體系，并對(duì)其進(jìn)行了優(yōu)化，認(rèn)為以

5、改良的MS培養(yǎng)基，附加0.2mg/LIBA、2mg/LBA和500mg/L的-谷氨酰胺的配方最好，體胚的誘導(dǎo)率最高：體胚可以在原來(lái)的培養(yǎng)基上增殖；體胚的成熟培養(yǎng)以EDM5的效果最好。茶樹(shù)體胚發(fā)生過(guò)程進(jìn)行的形態(tài)學(xué)觀察表明，形態(tài)多樣的體胚進(jìn)行了分類，分為正常胚、不定形胚(畸形胚)、連體胚、花狀多子葉胚和愈傷化胚，正常胚和某些畸形胚可以萌發(fā)利用。體胚的發(fā)生過(guò)程的解剖學(xué)研究表明，茶樹(shù)的體胚及次生體胚主要起源是表皮的內(nèi)皮層，由多細(xì)胞或單細(xì)胞起源。