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文檔簡介
1、目的:通過采用單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)復制腎間質(zhì)纖維化(Renalinterstitial fibrosis,RIF)大鼠模型,觀察貝那普利對腎間質(zhì)纖維化的影響及其血液流變學和腎組織Periostin表達的變化。
方法:將36只SD大鼠隨機分為假手術組、模型組和貝那普利組,每組12只。模型組和貝那普利組大鼠麻醉、固定,結(jié)扎左側(cè)輸尿管。假手術組僅游離左側(cè)輸尿管,余不做任何處理。同步干預14天后,腹主動脈取血檢測血液流變學指標
2、、Scr及BUN變化;取左腎,剖開,一部分置于4%甲醛固定液固定,另一部分凍存于-80℃冰箱。HE染色及Masson染色觀察腎間質(zhì)變化;免疫組化檢測腎組織Ⅰ型膠原蛋白(Collagen-Ⅰ);ELISA方法檢測各組大鼠腎組織AngⅡ、TGF-β1、Periostin蛋白水平的變化;RT-PCR檢測各組大鼠腎組織TGF-β1 mRNA和Periostin mRNA表達的變化。
結(jié)果:(1)腎功能指標:與假手術組比較,模型組血
3、清肌酐和尿素氮含量顯著升高(P<0.05),貝那普利組與模型組比較,血清肌酐和尿素氮含量顯著降低(P<0.05)。(2)HE染色觀察:與假手術組比較,模型組腎小管明顯擴張變寬,可見管型,腎間質(zhì)大量炎癥細胞浸潤,纖維化明顯。貝那普利組腎小管稍增寬,少量炎癥細胞浸潤、無明顯的纖維化改變。(3)Masson染色顯示假手術組大鼠腎臟膠原染色主要位于腎小球基底膜、Bowman囊、系膜區(qū)和腎小管間的毛細血管周圍。模型組大鼠腎間質(zhì)寬度增加,亮綠色膠原
4、沉積顯著,腎小管上皮細胞萎縮,管腔擴張,彌漫的單核、淋巴細胞浸潤和成纖維細胞增生及膠原纖維化形成,纖維化程度明顯。貝那普利組較模型組,腎小管擴張、間質(zhì)增寬程度及膠原在間質(zhì)沉積程度均顯著降低。(4)血流變學的變化:和假手術組對比,模型組的血流高、中、低切變率下的全血黏度(BV)、血漿黏度(PV)、紅細胞壓積(Hct)等指標顯著升高(P<0.05),貝那普利組與模型組相比顯著降低(P<0.05)。(5)免疫組化檢測Ⅰ型膠原結(jié)果提示:模型組術
5、后2周腎小管間質(zhì)可見明顯棕黃色物質(zhì)表達,與假手術組相比顯著升高(P<0.05),貝那普利組與模型組相比顯著降低(P<0.05)。(6)ELISA檢測結(jié)果顯示模型組大鼠腎組織Periostin蛋白、TGF-β1蛋白、AngⅡ蛋白大量表達,與假手術組相比均顯著升高,貝那普利組與模型組相比顯著降低,(P<0.05)。(7)RT-PCR結(jié)果表明,Periostin mRNA在模型組大鼠腎組織大量表達,比假手術組增多85.37%(P<0.05),
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