siRNA干擾大腸癌細(xì)胞株galectin-3蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、廣州廣州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文碩士研究生學(xué)位論文siRNA干擾大腸癌細(xì)胞株galectin3蛋白表達(dá)的研究ThestudiesofThestudiesofinterferencestointerferencestothetheexpressionofcoloncancercelllineexpressionofcoloncancercellline’sgalectingalectin3proteinbyproteinbysi

2、RNAsiRNA專業(yè)名稱：腫瘤學(xué)學(xué)位申請人：黃青導(dǎo)師：黃健清副主任醫(yī)師導(dǎo)師單位：廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院二O一三年五月siRNA干擾大腸癌細(xì)胞株galectin3蛋白表達(dá)的研究研究生：黃青導(dǎo)師：黃健清副主任醫(yī)師中文摘要中文摘要研究背景：研究背景：SmallinterferingRNA(siRNA)是一種長度為2125核苷酸的小RNA分子，由Dicer（RNAaseⅢ家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶）加工而成，其是siRISC的主要成員，

3、可激發(fā)與之互補(bǔ)的目標(biāo)mRNA的沉默。本課題前期的研究顯示：免疫組織化學(xué)方法檢測到半乳糖凝集素3（galectin3）蛋白在II期大腸癌的實體瘤標(biāo)本中呈現(xiàn)一種高表達(dá)的趨勢，與癌旁組織相比，具有顯著性差異；且在隨后的大腸癌細(xì)胞實驗中發(fā)現(xiàn)，低分子柑橘果膠（LowmolecularweightcitruspectinLCP）奧沙利鉑聯(lián)合組較奧沙利鉑單藥組可增加大腸癌細(xì)胞HCT116、HT29的細(xì)胞凋亡，聯(lián)合組和單藥組差異具有顯著意義；此外，在小

4、鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的研究中還發(fā)現(xiàn)：ELISA方法檢測顯示Galectin3在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中呈高水平表達(dá)，與陰性對照組相比，差異具有顯著意義（P0.05）且LCP能明顯抑制結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生。本次實驗旨在通過對大腸癌細(xì)胞株中的galectin3蛋白進(jìn)行干擾來進(jìn)一步地證實galectin3蛋白在大腸癌治療中的作用同時也為大腸癌的靶向治療提供一定的積極的理論基礎(chǔ)。方法：方法：1.1.五種大腸癌細(xì)胞株五種大腸癌細(xì)胞株HCT116HCT116、H

5、T29HT29、SW116SW116、SW480SW480和SW620SW620的培養(yǎng)：的培養(yǎng)：1.1用含10%胎牛血清的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液，在37攝氏度、5%CO2的培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)五種大腸癌細(xì)胞株HCT116、HT29、SW116、SW480和SW620，每23天換液一次，待該貼壁細(xì)胞生長至80%密度時進(jìn)行傳代，傳代23次后選擇狀態(tài)較好的對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行試驗；1.2將上述對數(shù)期生長狀態(tài)較好的大腸癌細(xì)胞株進(jìn)行離心收集，然后向