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1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文MithramycinA對(duì)大腸癌細(xì)胞株骨橋蛋白OPN、轉(zhuǎn)錄因子Sp1表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究姓名:黃旭申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師:張聲20081201TheexperimentalstudiesofeffectsofMithramycinAontheexpressionofosteopontin、SplinthecolonrectalcarcinomacellsABSTRACTobjective
2、:ToexploretheexpressionoftranscriptionfactorSplandosteopontin(OPN)inthecolorectalcarcinomacelllines(SW480andSW620)wi也differentmetastaticpotential,WetreatthelineswiththemithramycinA(MIT,aSplinhibitor),andobservecellcultur
3、es’growth,exploretheinfluencesofOPNexpressionTheaimofthisstudyistodetecttheeffectsofSplandOPNonproliferationandmetastasisofthecolorectalcancerwhethertranscriptionfactorSplcouldbeaneffectivetherapeutictargetforhumancolore
4、ctalcancelMethods:TakenestablishedhumancolorectalcancercelllinesSW480andSW620invitroasresearchobject,RealtimePCR,Western—blotmethodsandcellularimmunofluorescencetechniquewereusedtodetecttheSpl、OPNexpressionatgeneleveland
5、proteinexpressionlevelbeforeandaftertreatmentwimMithramycinA,separatelyCellgrowthcurvewasusedtoassesstheinhibitoryeffectoftreatmentwitllMithramycinAoncellproliferationThemigrationpotentialofcancercells嘶thdifferenttreatme
6、ntswasanalyzedbythewoundhealingassayrespectivelyTheproductionofmatrixmetalloproteinases(MMPs)ofSW480andSW620celllinesweremeasuredbygelatinzymogrambeforeandaRertreatmentwithMithramycinAResults:RealtimePCRresultsshowedSW48
7、0(DukesBstage)andSW620(DukesCstage)hadSplandOPNexpression;Western—blotalsoshowedtheexpressionofSplandOPNproteinexistedinbothcelllinesThelevelofSplandOPNexpressionincelllineSW620WashigherthaninSW480(P005);aftertreated、^,i
8、mMithramycinA(010肛M,),thelowlevelofSplandOPNexpressioninbothlineswerevalidatedbyRealtimePCR,westernblottinganalysisandcellularimmunofluorescencetechnique(P005);Cellgrowthcurveshowedtheproliferationdecreasedaftertreatment
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