剔除自體活化CD8T細(xì)胞對(duì)MDS體外祖細(xì)胞培養(yǎng)集落形成的影響.pdf

1、目的：觀察剔除自體活化CD8 T細(xì)胞對(duì)MDS體外祖細(xì)胞培養(yǎng)集落形成情況的影響。 方法：用免疫磁珠體外剔除44例中低危MDS患者及5例正常人骨髓單個(gè)核細(xì)胞（Bone marrow nuclear cells,BMNC）中CD8CD57雙陽(yáng)性T淋巴細(xì)胞，剔除CD8CD57T及加回CD8CD57T（4倍）的BMNC分別培養(yǎng)，比較培養(yǎng)后細(xì)胞集落生長(zhǎng)情況差異，培養(yǎng)前后克隆細(xì)胞比例變化及髓系細(xì)胞標(biāo)志的變化。 結(jié)果：（1）44例中低危

2、MDS病例中，18例剔除CD8CD57 T的BMNC培養(yǎng)后，可見(jiàn)集落及集簇生成，7例僅見(jiàn)集簇生長(zhǎng)，19例僅見(jiàn)細(xì)胞密集分布；所有44例MDS病例中，加回CD8CD57T（4倍）的BMNC培養(yǎng)后，均無(wú)集落集簇生成，僅有散在細(xì)胞生長(zhǎng)，且細(xì)胞密度明顯低于去除CD8CD57 T的BMNC培養(yǎng)結(jié)果。正常對(duì)照組剔除CD8CD57 T及加回CD8CD57 T（4倍）的BMNC培養(yǎng)后，均有集落生成，集落計(jì)數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。（2）低危MDS組剔除CD8CD5

3、7 T細(xì)胞BMNC培養(yǎng)后粒系集落計(jì)數(shù)同CD8TcⅠ型極化偏移有相關(guān)性（r=0.372,p＜0.05），而同CD4/CD8及CD4 ThⅠ型極化偏移無(wú)相關(guān)性；總細(xì)胞集落、粒系及粒紅系集落計(jì)數(shù)同CD4/CD8均無(wú)相關(guān)性。（3）低危MDS組BMNC中CD34陽(yáng)性細(xì)胞，CD33陽(yáng)性細(xì)胞，及CD13陽(yáng)性細(xì)胞比率均較正常對(duì)照組有所增加（P<0.05）。剔除抑制因素培養(yǎng)后，低危MDS組CD34陽(yáng)性細(xì)胞，CD33陽(yáng)性細(xì)胞比率下降，與培養(yǎng)前相比有顯著性差

4、異（P<0.05）；CD13陽(yáng)性細(xì)胞比率在MDS患者組可見(jiàn)略下降，與培養(yǎng)前相比沒(méi)有顯著性差異(P>0.05）。而正常對(duì)照組，CD34,CD33,CD13剔除活化CD8T培養(yǎng)前后略有改變,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（4） 2例單純＋8異常低危MDS病例，治療前收取骨髓標(biāo)本，剔除CD8CD57 T細(xì)胞培養(yǎng)前，+8克隆細(xì)胞比例分別為17％和27.6％，剔除CD8CD57 T細(xì)胞培養(yǎng)后，+8克隆細(xì)胞比例各自為47％和54.4％。2例20q－異常的初治

5、病例，剔除CD8CD57 T細(xì)胞培養(yǎng)前，異?？寺〖?xì)胞比例分別為45％和15％，剔除CD8CD57 T細(xì)胞培養(yǎng)后，異常克隆細(xì)胞比例增加為57％和43.6％。 結(jié)論：在體外選擇性剔除骨髓中自體活化CD8T細(xì)胞，可以增加MDS患者骨髓體外培養(yǎng)祖細(xì)胞集落形成，集落中髓系細(xì)胞向較成熟階段分化。提示CD8CD57雙陽(yáng)性細(xì)胞可能通過(guò)免疫途徑參與骨髓無(wú)效造血。而剔除活化CD8細(xì)胞造成克隆細(xì)胞明顯增加，提示CD8介導(dǎo)的免疫過(guò)程可能主要是針對(duì)MDS