胞外組蛋白對(duì)肝組織的損傷效應(yīng)與肝衰竭發(fā)病機(jī)制相關(guān)性的研究.pdf_第1頁
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1、目的:探討肝衰竭(LF)時(shí)胞外組蛋白對(duì)肝組織細(xì)胞的損傷效應(yīng)及其機(jī)制。
  方法:通過HE染色及免疫組化觀察肝衰竭肝組織中肝臟細(xì)胞(主要是肝細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞)的損傷及炎癥細(xì)胞浸潤情況;收集LF患者血清,測(cè)定組蛋白H3與H4、PTA、TBil、Cr、國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(international normalized ratio,INR),計(jì)算患者終末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)

2、評(píng)分;比較患者與健康者血清中組蛋白水平,統(tǒng)計(jì)分析其與PTA、MELD評(píng)分的相關(guān)性;用患者血清、培養(yǎng)的L-02人肝細(xì)胞裂解上清液、上清液+抗組蛋白H3與H4抗體分別處理培養(yǎng)的L-02細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)與凋亡率;用純化組蛋白處理培養(yǎng)的L-02細(xì)胞,觀察胞內(nèi)鈣離子濃度及半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性;用APC預(yù)處理的純化組蛋白處理L-02細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞,觀察組蛋白的細(xì)胞損傷效應(yīng)。
  結(jié)果:肝衰竭

3、肝組織中見肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞大量破壞,炎癥細(xì)胞廣泛浸潤;與健康者[H3:(42.67±12.80)μg/mL/ H4:(40.34±14.56)μg/mL]比較,患者胞外組蛋白濃度[H3:(5390.29±1032.03)μg/mL/H4:(4205.09±662.34)μg/mL]顯著升高(t=32.76/t=39.74,均P<0.01),且患者胞外組蛋白H3/H4水平與PTA均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.325,P=0.038/r=-0.57

4、2,P=0.028)、與MELD評(píng)分均呈正相關(guān)(r=0.359,P=0.021/r=0.568,P=0.007);患者血清、L-02細(xì)胞裂解上清液對(duì)培養(yǎng)的L-02細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞均有損傷效應(yīng),該效應(yīng)受抗組蛋白抗體抑制[(9.3±1.5)%比(14.3±0.6)%,t=4.259,P=0.02];經(jīng)組蛋白處理,培養(yǎng)的L-02細(xì)胞胞內(nèi)鈣離子濃度([Ca2+]i)上升、Caspase-3活性隨組蛋白處理濃度增加而增強(qiáng),抗組蛋白抗體對(duì)Cas

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