尼古丁刺激DCs抗腫瘤機(jī)制及腫瘤微環(huán)境DCs失能研究.pdf

1、樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)是機(jī)體最為重要的抗原遞呈細(xì)胞,其介導(dǎo)產(chǎn)生的抗原特異性CTL是機(jī)體抗腫瘤免疫的主要機(jī)制,因此DCs的功能狀態(tài)直接影響腫瘤免疫治療的效果,也可能與腫瘤在機(jī)體內(nèi)的免疫逃避密切相關(guān)。為探討尼古丁刺激未成熟DCs(immature DCs,imDCs)抗腫瘤機(jī)制和腫瘤細(xì)胞對imDCs功能狀態(tài)的影響,imDCs先以尼古丁刺激或與表達(dá)腫瘤特異性抗原的小鼠淋巴瘤細(xì)胞EG7、表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原的小鼠黑色素

2、瘤細(xì)胞B16和小鼠肝癌細(xì)胞Hepal-6體外直接共培養(yǎng),次以流式細(xì)胞術(shù)檢測imDCs的表面分子表達(dá)情況、吞噬能力及imDCs所介導(dǎo)的抗原特異性淋巴細(xì)胞增殖能力,再以ELISA、ELISPOT分別檢測imDCs所介導(dǎo)抗原特異性淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)中細(xì)胞因子IL-12分泌、抗原特異性CTL增殖分化情況,最后以表達(dá)腫瘤特異性抗原之小鼠淋巴瘤EG7細(xì)胞、表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原之小鼠淋巴瘤EL4、肺癌LLC、肝癌Hepa1-6細(xì)胞荷瘤小鼠,并經(jīng)腹腔轉(zhuǎn)輸尼古

3、丁刺激聯(lián)合腫瘤抗原負(fù)載之imDCs,檢驗(yàn)?zāi)峁哦〈碳mDCs的抗腫瘤效果。結(jié)果顯示:尼古丁刺激不但可明顯增加imDCs CD80、CD86、CD40、CD54等表面分子和趨化因子受體CCR7表達(dá),而且也明顯增強(qiáng)imDCs對抗原的吞噬能力；尼古丁刺激也明顯增強(qiáng)imDCs所介導(dǎo)的抗原特異性淋巴細(xì)胞增殖、IL-12分泌、CTL增殖分化能力；尤為重要的是,小鼠荷瘤實(shí)驗(yàn)證實(shí),尼古丁刺激。imDCs體內(nèi)轉(zhuǎn)輸不但對表達(dá)腫瘤特異性抗原的淋巴瘤有預(yù)防和和

4、治療效果,而且也可用于表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原的小鼠淋巴瘤、肺癌、肝癌的預(yù)防和治療。腫瘤細(xì)胞-imDCs共培養(yǎng)不但顯著降低im=DCs表面分子CD80、CD54、CD11b、CD11a及MHCⅡ類分子表達(dá),而且也降低imDCs所介導(dǎo)的抗原特異性淋巴細(xì)胞增殖、IL-12分泌及CTL增殖分化能力。上述結(jié)果提示:尼古丁刺激能明顯改善imDCs所介導(dǎo)的抗原特異性CTL增殖的能力,尼古丁刺激imDCs具有明顯的抗腫瘤效應(yīng),尼古丁刺激imDCs可望成為腫瘤