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文檔簡介
1、雙酚A(Bisphenol A,BPA)是一種具有代表性的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,廣泛用于生產(chǎn)聚碳酸脂、環(huán)氧樹脂等材料,如罐頭內(nèi)涂層、食品包裝材料、飲料容器、嬰兒奶瓶、水瓶和牙齒封閉劑等。磨損老化、高溫、強酸、強堿都可加速BPA酯鍵的水解而釋放出BPA單體。隨著這些物品的廣泛使用及降解,BPA在環(huán)境中的排放量急劇增加,它已經(jīng)成為人類不可避免的一種環(huán)境污染物。許多國家人群的血清或尿液中BPA的檢出率均在90%以上。
作為一種環(huán)境雌激素
2、干擾物,BPA進入人體后主要通過模擬或干擾體內(nèi)雌激素的合成、分泌、轉(zhuǎn)運、結(jié)合和排泄,從而干擾雌激素正常的生理功能。美國國家毒理學會規(guī)劃處研究發(fā)現(xiàn),由于育齡期女性體內(nèi)BPA含量明顯高于男性,且BPA很容易通過胎盤和乳汁傳遞給胎兒和嬰兒,嬰幼兒血清中BPA水平可達到成年人的5~10倍,可能會對胎兒和嬰幼兒的腦發(fā)育產(chǎn)生不良影響,在兒童和青少年時期出現(xiàn)精神、行為和智力異常。
近年來,雌激素對非生殖功能,如認知、情緒等的調(diào)節(jié),尤其是與學
3、習記憶的關系越來越受到人們的關注。雌激素主要通過雌激素受體(Estrogen Receptor,ER)調(diào)節(jié)腦發(fā)育、突觸可塑性及學習和記憶等腦的高級功能。研究證實,BPA可通過調(diào)控細胞色素P450芳香化酶(Cytochrome P450 aromatase,CYP)的表達和活性來改變腦內(nèi)雌激素的合成,而雌激素水平的變化又可調(diào)節(jié)不同腦區(qū)兩種雌激素受體:ERα和ERβ的表達水平,因此雌激素的兩種效應機制——經(jīng)典的雌激素核受體機制和非基因組細胞
4、信號系統(tǒng)均參與BPA對腦學習與記憶功能的影響。
因此,本研究采用去卵巢大鼠模型和假手術(shù)大鼠模型,觀察低劑量BPA對雌性大鼠的學習記憶能力的影響及其與雌激素水平之間的關系,為進一步了解BPA的神經(jīng)毒作用機制提供科學依據(jù)。
第一部分:低劑量BPA對雌性大鼠子宮的影響
目的:研究低劑量BPA對雌性大鼠子宮的影響。
方法:SD雌性大鼠80只,隨機分為四組:去卵巢BPA組、去卵巢對照組、假手術(shù)BPA組和假手
5、術(shù)對照組,每組20只。術(shù)后2周,去卵巢BPA組和假手術(shù)BPA組大鼠,每日腹腔注射50μg/kgBPA,去卵巢對照組和假手術(shù)對照組,每日腹腔注射相同劑量的花生油,連續(xù)4周。觀察大鼠染毒后的毒性表現(xiàn),并計算子宮系數(shù)。
結(jié)果:(1)染毒期間,各組大鼠均未見明顯中毒癥狀,體重隨染毒天數(shù)逐漸增加,各組間差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。(2)與假手術(shù)對照組相比,去卵巢BPA組、去卵巢對照組和假手術(shù)BPA組大鼠的子宮系數(shù)明顯降低,差異有統(tǒng)
6、計學意義(p<0.01);與去卵巢對照組相比,去卵巢BPA組大鼠的子宮系數(shù)明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。
結(jié)論:低劑量BPA對去卵巢大鼠的子宮表現(xiàn)出一定的類雌激素活性,但對假手術(shù)大鼠的子宮表現(xiàn)出一定的抗雌激素活性,提示低劑量BPA的效應可能與內(nèi)源性雌激素的水平有關。
第二部分:低劑量BPA對雌性大鼠學習記憶能力的影響
目的:研究低劑量BPA對雌性大鼠學習記憶能力的影響。
方法:Mor
7、ris水迷宮試驗檢測大鼠的學習記憶能力。
結(jié)果:①在隱蔽平臺試驗中,與假手術(shù)對照組相比,去卵巢對照組、去卵巢BPA組和假手術(shù)BPA組的潛伏期明顯延長,游泳路程增加,差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)②在空間探索試驗中,去卵巢BPA組的大鼠空間記憶保留時間較去卵巢對照組短(p<0.05)③在可視平臺試驗中,與假手術(shù)對照組相比,各實驗組大鼠的逃避潛伏期和游泳路程,差異均無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。
結(jié)論:去除卵巢后,雌
8、性大鼠的學習記憶能力明顯下降;低劑量BPA可以損傷假手術(shù)大鼠的學習能力和去卵巢大鼠的記憶能力,提示低劑量BPA的神經(jīng)毒效應可能與內(nèi)源性雌激素水平有關。
第三部分:低劑量BPA對雌性大鼠血清雌二醇和睪酮含量的影響
目的:研究低劑量BPA對雌性大鼠血清雌二醇(E2)和睪酮(T)含量的影響。
方法:ELISA法檢測血清E2和T的含量。
結(jié)果:(1)與假手術(shù)對照組相比,去卵巢對照組和假手術(shù)BPA組的E2水
9、平明顯降低;與去卵巢對照組相比,去卵巢BPA組的E2水平明顯升高;與假手術(shù)BPA組相比,去卵巢BPA組的E2水平明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(p<0.05)(2)各組雌性大鼠血清T水平未見明顯差異(p>0.05)。
結(jié)論:低劑量BPA可降低假手術(shù)雌性大鼠血清E2水平,表現(xiàn)出抗雌激素活性;低劑量BPA可明顯改善去卵巢雌性大鼠的E2水平,表現(xiàn)出典型的雌激素效應。未見低劑量BPA對T有明顯影響。
第四部分:低劑量BPA對雌
10、性大鼠腦組織中芳香化酶表達的影響
目的:研究低劑量BPA對雌性大鼠腦組織CYP表達的影響。
方法:Westernblot法檢測CYP的表達,HE染色法觀察腦組織的形態(tài)變化。
結(jié)果:(1)海馬:與假手術(shù)對照組相比,去卵巢對照組海馬CYP的表達明顯下降(p<0.05);與去卵巢對照組相比,去卵巢BPA組大鼠海馬CYP表達明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)(2)下丘腦:與假手術(shù)對照組相比,去卵巢對照組大
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