HB增強(qiáng)低強(qiáng)度超聲對(duì)鼻咽癌細(xì)胞殺傷作用的研究.pdf

1、鼻咽癌(Nasopharyngeal careinoma)是一種好發(fā)于中國南方的惡性腫瘤。目前的治療方法存在一定的局限性和嚴(yán)重的副作用。尋找選擇性好、副作用小的有效方法一直是人們追求的目標(biāo)。
　　 光動(dòng)力治療(photodyhamic therapy,PDT)是一種選擇性好、副作用相對(duì)小的腫瘤治療方法。它主要是利用選擇性潴留于增殖活躍組織的光敏劑在一定波長的光照下產(chǎn)生細(xì)胞毒作用的活性氧物質(zhì)摧毀腫瘤組織細(xì)胞。由于光在生物組織中的穿

2、透能力有限,嚴(yán)重影響到光動(dòng)力治療的實(shí)際應(yīng)用。令人欣慰的是,有研究發(fā)現(xiàn)一些光敏劑也能被超聲活化。這一發(fā)現(xiàn)激起了人們對(duì)聲動(dòng)力治療(Sonodynamic therapy,SDT)研究的興趣。相繼發(fā)現(xiàn)卟啉類光敏劑極易被超聲激活產(chǎn)生活性氧物質(zhì),并得到廣泛深入的研究。竹紅菌素B(hypocrellin B,HB)是新近開發(fā)成功的一種中草藥光敏劑,其成分單一,化學(xué)結(jié)構(gòu)明確,性質(zhì)穩(wěn)定,是一種很有發(fā)展前景的新型光敏劑。開展竹紅菌素B成為一種新型聲敏劑引

3、起我們的廣泛興趣,因此,本研究采用超聲頻率為1.7 MHz.聲強(qiáng)為O.65 w/cm2為實(shí)驗(yàn)參數(shù),探討了低強(qiáng)度超聲聯(lián)合竹紅菌素B對(duì)鼻咽癌CNE2細(xì)胞株的影響,旨在為聲動(dòng)力治療提供新的聲敏劑,并為鼻咽癌的臨床治療提供新的技術(shù)手段。
　　 材料與方法:采用倒置顯微鏡觀察和CCK-8法檢測低強(qiáng)度超聲活化HB聲動(dòng)力作用后CNE2細(xì)胞的生長狀況；應(yīng)用流式細(xì)胞檢測術(shù)和Hoechst33258細(xì)胞核熒光染色法觀察超聲活化HB介導(dǎo)的聲動(dòng)力作用對(duì)

4、CNE2細(xì)胞凋亡的影響；通過Rhodamine123染色法了解細(xì)胞線粒體膜電位變化情況；最后通過透射電鏡觀察聲動(dòng)力作用后細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化情況。
　　 結(jié)果:HB能顯著增強(qiáng)低強(qiáng)度超聲對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞的殺傷效率,CCK-8法檢測發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間的增加細(xì)胞抑制率較對(duì)照組顯著增加,倒置顯微鏡下觀察到HB介導(dǎo)的聲動(dòng)力組細(xì)胞數(shù)量較其他對(duì)照組明顯減少,細(xì)胞固縮,單純HB對(duì)細(xì)胞沒有細(xì)胞毒性作用；Hoechst33258細(xì)胞核熒光染色示US(

5、0.65 w/cm2)活化HB(2.5 uM)介導(dǎo)的聲動(dòng)力組出現(xiàn)核凝聚、凋亡小體；同時(shí)流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率發(fā)現(xiàn)HB介導(dǎo)的聲動(dòng)力組,在聲動(dòng)力作用18小時(shí)候細(xì)胞早期凋亡率達(dá)18.61％；Rhodamine123染色對(duì)CNE2細(xì)胞線粒體膜電位檢測顯示HB介導(dǎo)的聲動(dòng)力組,在聲動(dòng)力作用4小時(shí)后細(xì)胞線粒體膜電位明顯降低,最后透射電鏡觀察到HB介導(dǎo)的聲動(dòng)力組,在聲動(dòng)力作用18小時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)線粒體腫脹溶解,大部分細(xì)胞壞死,碎裂。
　　 結(jié)論: