hTERTp調(diào)控TK基因靶向性殺傷鼻咽癌細胞的實驗研究.pdf_第1頁
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1、中南大學碩士學位論文hTERTp調(diào)控TK基因靶向性殺傷鼻咽癌細胞的實驗研究姓名:徐芳申請學位級別:碩士專業(yè):耳鼻咽喉頭頸外科指導教師:邱元正20070501中南大學碩士學位論文英文摘要ABSTRACTPURPoSE:ToconstructhumanTclomeraseReverseTranscriptasePromoter/TKspecifctumorspecificexpressingsystem,andinvestigateitsd

2、irectionaleffectofkillingandwoundingtheNasopharyngealcarcinomatumorcellsMElll0DS:ThehTERTpromoterandTKgenewerecloned,andwhichwasconnectedtothePGL3carrierafterenzymedigestiontoconstructtheh1ERTp/PGL3、TK/PGL3、h1ERTp/TK/PGL

3、3recombinantcarriersandthentoconstructtheC^正Vm(伊GL3recombinantcarrierswiththesimilarmethodandregardCM[vasthepositivecontr01ThehTERTp/PGL3、TK伊GL3、111ERTp/TK/PGL3andCMV,IK巾GL3weretransfectedintothenasopharyngealcarcinomaHN

4、ElcellsandthenormalfibroblasttransientlywiththeapplicationofbangosomethroughR1PC&After24hours,itwasaddedinGC、‘toexaminetheappearanceofthecellanddetectthedeathofnasopharyngealcarcinomacellAfter48hours,thecellwasharvestedt

5、odetecttheexpressionoftelomeraseanditssubunithTERTandTKgeneinthetrailsfectioncellanddetectthecytoactivewith~ⅡTRESULTS:Therewasasuccessfjll|constructioninidentifyIlTERTp/PGL3、1K/PGL3、hTERTp/TK/PGL3andCAnr仍/PGL3recombinant

6、plasmidbydoubledigestionwithrestrictionendonucleasesTheluciferaseactivitytestmanifestedthattheactivityofC~Ⅳ伊GL3issuperiortohTERTp/PGL3theeffectofkillingNPCHNElcellofhTERTp/TK/PGL3ishigherthanthehTERTp/PGL3、1]K伊GL3control

7、groupbutlowerthanthepositivegroup111eexpressionsof,n【genewerehigherthanthehTERTp/PGL3、1]K/PGL3controlgroupsandtheexpressionoftelomeraseanditssubunithTERTpwerelowerthanthepositivecontrolgroupsCONCLUSIoN:hTERTp/TKarumorspe

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