骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)心力衰竭大鼠心功能的影響及其機(jī)制的探討.pdf

1、目的：通過靜脈注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)至心力衰竭大鼠體內(nèi)，觀察MSCs是否向損傷心臟歸巢，探討MSCs對(duì)心力衰竭大鼠心功能的影響及其機(jī)制。 方法：1、36只12周齡近交系F344大鼠通過腹腔注射阿霉素(2mg/kg，每周一次，連續(xù)6周)建立心衰模型。6周后存活大鼠再隨機(jī)分為細(xì)胞移植組(n=16)和心衰組(n=16)。另隨機(jī)選取10只12周齡F344大鼠作為正常組，腹腔注射等量的生理鹽水。2、從8周齡F344大鼠分離純化M

2、SCs進(jìn)行體外培養(yǎng)，采用流式細(xì)胞儀對(duì)體外培養(yǎng)的MSCs的表型CDllb／c、CD34、CD44和CD90進(jìn)行鑒定。取第三代MSCs進(jìn)行移植。移植前MSCs用4，6一聯(lián)脒一2一苯基吲哚(DAPI)進(jìn)行標(biāo)記。 3、末次阿霉素注射后一周，將3×106個(gè)MSCs通過股靜脈注射至細(xì)胞移植組大鼠。心衰組大鼠注射等量培養(yǎng)基。細(xì)胞移植后4周，采用生理記錄儀測(cè)量三組大鼠的心功能。4、熒光顯微鏡下觀察移植細(xì)胞是否歸巢到心臟；心肌組織切片行免疫熒光化

3、學(xué)染色了解移植細(xì)胞在受體心臟的分化情況。5、心肌組織切片行Ⅷ因子免疫組化，計(jì)算血管密度。6、左室心肌組織切片行天狼猩紅染色，計(jì)算膠原容積分?jǐn)?shù)(CVP)。 結(jié)果：1、體外培養(yǎng)的第三代MSCs流式細(xì)胞儀鑒定結(jié)果顯示：CD44陽性細(xì)胞數(shù)占99．8％±O．9％，CD90陽性細(xì)胞數(shù)占97．7％±0．4％，而CDllb／c陰性細(xì)胞數(shù)占84．2％±0．2％，CD34陰性細(xì)胞占97．91％±0．7％。2、細(xì)胞移植后4周，心功能測(cè)定顯示：與正常組

4、相比，心衰組LVSP、LV+dP／dt和LV一dP／dt均明顯下降(P<0．05)，而LVDP明顯升高(P<0．05)；與心衰組相比，細(xì)胞移植組大鼠的LVSP、LV+dP／dt和LV-dP／眥均有明顯升高(P<0．05)，而LVDP明顯降低(P<0．05)。3、熒光顯微鏡下觀察，細(xì)胞移植組大鼠的心肌切片上有DAPI標(biāo)記的移植細(xì)胞存活，并且表達(dá)心肌特異性抗原心肌肌球蛋白重鏈(B-MHC)。4、心肌組織免疫組化顯示：與心衰組相比，細(xì)胞移植組