骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)模型大鼠生精功能障礙的作用.pdf

1、研究背景及目的:
　　不育是泌尿男科門診常見(jiàn)疾病，影響約15％的夫婦，并且男性因素作為主要因素的約占30％，而大約40％的夫婦雙方都有問(wèn)題。雄性不育的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，病因明確者采用對(duì)癥治療，而原因不明者，多采用經(jīng)驗(yàn)治療，效果多不滿意。近些年來(lái)，輔助生育技術(shù)發(fā)展迅速，為廣大不育患者提供了福音，但輔助生育技術(shù)違反了生物界自然選擇的規(guī)律，而且輔助生育技術(shù)都是有創(chuàng)的，經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)較大，并具有潛在的健康風(fēng)險(xiǎn)。而且對(duì)于那些一方不能產(chǎn)生有功能

2、配子的夫婦，除了求助于異體供體沒(méi)有其他的治療方案。
　　近些年來(lái)隨著干細(xì)胞在雄性不育中的研究深入，發(fā)現(xiàn)干細(xì)胞可以分化為生殖細(xì)胞，為雄性不育的治療和發(fā)病機(jī)制研究提供了新的途徑。本文就骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植是否對(duì)大鼠生精障礙研究具有治療作用，并初步探討其潛在的機(jī)制，為臨床上雄性不育的治療提供更多的治療方法。
　　方法:
　　75只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)均分為5組，每組15只。A組為正常對(duì)照組，B組為低劑量照射對(duì)照組，C

3、組高劑量照射對(duì)照組，D組為低劑量照射治療組，E組為高劑量照射治療組。B組和D組兩組大鼠均以60Coγ射線局部照射1次，C組和E組大鼠均局部照射2次（間隔一周照射）。造模成功后，D組和E組給予大鼠睪丸骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植，飼養(yǎng)8周。8周后，稱取體重及睪丸重量，并計(jì)算睪丸指數(shù)。采用ELISA法檢測(cè)血清中FSH、LH、T的水平，應(yīng)用HE染色觀察大鼠睪丸組織形態(tài)學(xué)變化，應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)GFP、InhibinB、P450scc和VASA表達(dá)情

4、況，雙重免疫熒光檢測(cè)GFP和VASA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　照射對(duì)照組體重及睪丸指數(shù)均明顯下降，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而治療組體重則與正常對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而睪丸指數(shù)仍明顯下降，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。性激素方面，模型組及治療組血清FSH顯著提高，T含量明顯降低，LH升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療后，F(xiàn)SH、LH下降，T升高，兩組LH和T變化均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

5、P＜0.05);而高劑量治療組FSH下降無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。睪丸組織病理學(xué)方面，照射對(duì)照組曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)破壞明顯，可見(jiàn)極少量的支持細(xì)胞和精原細(xì)胞，以高劑量對(duì)照組破壞更為明顯;治療后，低劑量干細(xì)胞組大鼠生精功能有所恢復(fù)，而高劑量干細(xì)胞組生精功能恢復(fù)欠佳。RT-PCR示:照射模型組睪丸組織中InhibinB、P450scc和VASAmRNA幾乎不表達(dá);給予治療后，低劑量治療組大鼠InhibinB、P450scc和VASAmRNA表達(dá)