PI3K-Akt信號通路對大鼠心肌缺血后處理心臟功能的保護(hù)作用及重組人促紅細(xì)胞生成素的干預(yù).pdf

1、目的：通過建立的大鼠急性心肌缺血再灌注模型,觀察心肌缺血后處理(,I-postC)及重組人促紅細(xì)胞生成素注射液(rhEPO)對大鼠的心臟功能、血清肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)、乳酸脫氫酶(LDH)含量、心肌梗塞面積、心肌組織中AktmRNA、p70s6kmRNA表達(dá)及蛋白表達(dá)水平的影響,旨在研究PI3K/Akt信號通路對I-postC大鼠心臟功能的影響及rhEPO的干預(yù)。
　　 方法：84只雄性SD大鼠隨機(jī)分

2、為:①假手術(shù)組(Sham組)、②缺血/再灌注組(I/R組)、③缺血后處理組(I-postC組)、④缺血后處理+Wortmannin組(I-postC+Wort組)、⑤rhEPO組、⑥r(nóng)hEPO+Wortmannin組(rhEPO+Wort組)及⑦rhEPO+I-postC組,構(gòu)建大鼠心肌缺血再灌注模型,術(shù)中監(jiān)測心電及血流動力學(xué)變化,于再灌注結(jié)束后右頸總動脈取血測定CK、LDH活力,并采用“伊文氏藍(lán)-TTC”法測定心肌梗塞面積,采用逆轉(zhuǎn)錄

3、聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcriptase-polymerasechain reaction,RT-PCR)法檢測各組心肌組織中Akt mRNA、p70s6kmRNA水平,免疫組織化學(xué)法檢測各組心肌組織中Akt、p70s6k蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：(1)心臟舒縮功能:I/R組、I-PostC+Wort組和rhEPO+Wort組較Sham組心臟舒縮功能明顯受損(P<0.05)；I-Post組、rhEPO組、rhE

4、PO+I-Post組較I/R組心臟舒縮功能明顯改善(P<0.05)；I-Post+Wort組、rhEPO+Wort組較I-Post組心臟舒縮功能明顯減弱(P<0.05)；rhEPO+Wort組較rhEPO組心臟舒縮功能明顯減弱(P<0.05)。I-PostC組、rhEPO組、rhEPO+I-PostC組心臟舒縮功能無明顯差異。(2)血清CK、LDH含量:I/R組、I-PostC+Wort組、rhEPO+Wort組較Sham組血清CK、L

5、DH含量均明顯增高(P<0.05),I-PostC組、rhEPO組和rhEPO+I-PostC組血清CK、LDH含量較I/R組明顯降低(P<0.05)；I-PostC+Wort組和rhEPO+Wort組較I-PostC組血清CK、LDH含量顯著增高(P<0.05)；rhEPO+Wort組較rhEPO組明顯增高(P<0.05)。I-PostC組、rhEPO組與rhEPO+I-PostC組間比較,均未發(fā)現(xiàn)明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；I-

6、PostC+Wort組、rhEPO+Wort組與I/R組間比較,亦未見明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。(3)心肌梗塞面積:I-PostC組、rhEPO組和rhEPO+I-PostC組心肌梗塞面積較I/R組明顯減少(P<0.05)；I-PostC+Wort組和rhEPO+Wort組較I-PostC組心肌梗塞面積顯著增大(P<0.05):rhEPO+Wort組較rhEPO組明顯增大(P<0.05)。I-PostC組、rhEPO組與rhEPO

7、+I-PostC組組間比較,均未見明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；I-PostC+Wort組、rhEPO+Wort組與I/R組組間比較,亦未見到明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。(4)心肌組織中Akt、p70s6k蛋白表達(dá):各組大鼠心肌組織均有Akt、p70s6k蛋白表達(dá),以Sham組表達(dá)最低。I-PostC組、rhEPO組、rhEPO+I-PostC組較I/R組顯著增高(P<0.05)；I-PostC+Wort組、rhEPO+Wort組

8、較I-PostC組明顯降低(P<0.05);rhEPO組和rhEPO+I-PostC組較I-PostC+Wort組顯著增高(P<0.05)；rhEPO+Wort組較rhEPO組顯著降低(P<0.05)；rhEPO+I-PostC組較rhEPO+Wort組顯著增高(P<0.05)。而I-PostC組、rhEPO組、rhEPO+I-PostC組組間Akt、p70s6k蛋白的表達(dá)以及I/R組、I-POStC+Wort組、rhEPO+Wort組

9、組間Akt、p70s6k蛋白的表達(dá)差異均無顯著性。(5)心肌組織中Akt mRNA、p70s6k mRNA表達(dá):各組大鼠心肌組織中均有Akt mRNA、p70s6k mRNA的表達(dá),以Sham組表達(dá)最低。I-PostC組、rhEPO組、rhEPO+I-PostC組較I/R組顯著增高(P<0.05):I-PostC+Wort組、rhEPO+Wort組較I-PostC組明顯降低(P<0.05):rhEPO組和rhEPO+I-PostC組較I

10、-PostC+Wort組顯著增高(P<0.05):rhEPO+Wort組較rhEPO組顯著降低(P<0.05)；rhEPO+I-PostC組較rhEPO+Wort組顯著增高(P<0.05)。而I-PostC組、rhEPO組、I-PostC+rhEPO組組間、I/R組、I-PostC+Wort組、rhEPO+Wort組組間差異均無顯著性。
　　 結(jié)論：(1)大鼠的心肌缺血再灌注損傷可引起心臟舒縮功能嚴(yán)重受損、心肌組織嚴(yán)重?fù)p傷。(2

11、)I-PostC能顯著改善缺血再灌注損傷所導(dǎo)致的心臟舒縮功能嚴(yán)重受損、心肌組織嚴(yán)重?fù)p傷。(3)PI3K特異性抑制劑Wortmannin可削弱I-PostC對心臟舒縮功能、心肌組織損傷的改善作用,降低心肌組織中Akt mRNA、p70s6k mRNA表達(dá)及其蛋白表達(dá)水平,提示I-PostC對I/R所致心臟舒縮功能、心肌組織損傷的保護(hù)作用可能與激活PI3K-Akt信號通路及其下游靶點p70s6k有關(guān)。(4)rhEPO亦能明顯改善缺血再灌注損