成纖維生長因子在大鼠后肢發(fā)育早期不同階段表達變化及意義.pdf

1、背景 成纖維生長因子(fibroblast growth factors，F(xiàn)GFs)是一類具有廣泛生物學效應的生長因子，具有促進血管生成、影響胚胎發(fā)育、刺激成纖維細胞增殖和加速傷口愈合等作用。其中FGF-2(也稱bFGF)表達范圍最廣，也最為重要。既往的研究發(fā)現(xiàn)FGFs在骨骼、軟骨和血管等組織的發(fā)育過程中起著重要的調節(jié)作用，而且作用機制比較復雜。目前尚未見國內有關FGFs在肢體發(fā)育早期表達變化的動物實驗研究的文獻報道。

2、目的 通過在大鼠肢體發(fā)育早期血清學FGF的表達以及后肢標本中bFGF的表達情況，明確其在大鼠后肢肢體發(fā)育早期過程中在組織中和時間上的變化規(guī)律，從而推測其對于各種組織細胞可能產生的生物學作用。 材料與方法 清潔級SD孕鼠5只，實驗前設計5只清潔級孕鼠的新生鼠為實驗樣本量。在5只清潔級孕鼠生產前隨意確定為A、B、C、D和E組鼠，A～E組鼠分別于生后1、3、5、10和15天處死，留取血清及雙側后肢的標本，由于A、B組鼠

3、(生后1天、3天)難以留取0.5mL的血清，僅留取C～E組鼠的血清。A～E組鼠分別生產10、6、8、6和6只新生鼠。C～E組新生鼠分別留取8、6和6份血清標本、A～E組分別留取20、12、16、12、12個雙后肢肢體標本供實驗所用。對血清標本用EIJSA法測定血清中FGF的濃度，并對各組進行統(tǒng)計學分析，以明確是否隨時間變化而產生對后肢差異。對后肢標本進行bFGF的免疫組化染色，從而觀察bFGF在后肢標本中的表達情況。通過各組織間比較，觀

4、察bFGF的在不同組織中表達變化的規(guī)律。 結果 在C、D、E組中FGF在血清中的平均濃度(用x±s表示)分別為：0.279±0.264、-0.0353±0.067、-0.077±0.090(ng/mL)。通過秩和檢驗，發(fā)現(xiàn)C、D組間和C、E組間FGF濃度在統(tǒng)計學上存在顯著的差異(P<0.01)，而D、E組間統(tǒng)計學差異不明顯(P>0.05)。在新生小鼠的后肢標本組織學bFGF免疫組化染色中，可見其表達的范圍較廣，在軟骨、肌

5、肉、骨膜和血管內壁中均有表達，且隨時間變化存在一定的變化規(guī)律：1)在血管內壁中早期表達強，隨生后天數(shù)增加而逐漸減弱，在E組(生后15天)，組織中bFGF表達已不明顯。2)在骨骼肌組織中可見bFGF的表達，呈現(xiàn)出隨生后天數(shù)增加有逐漸減弱的趨勢。3)在關節(jié)軟骨中bFGF表達較強，且在關節(jié)面軟骨的表達要強于中心部位的軟骨，這種表達隨出生后天數(shù)增加也呈現(xiàn)出逐漸減弱的趨勢。4)bFGF在骨骺部增殖層和肥大細胞層以及骨膜內均可見表達，早期表達較強，

6、隨時間變化呈逐漸減弱趨勢，在D組(生后10天)及E組(生后15天)中bFGF‘表達已不明顯。5)在B組～E組干骺端成骨細胞內可見bFGF的表達，且這種表達不同于它在其他組織內的表達，并不隨生后時間的延長而呈現(xiàn)減弱的趨勢，一直呈現(xiàn)為較高的表達。 結論 在大鼠后肢發(fā)育的早期，bFGF在后肢肢體各組織中存在著良好的表達，提示它在肢體發(fā)育過程中與軟骨增殖、關節(jié)發(fā)育與關節(jié)內軟骨基質的形成、肢體血管生成以及肌肉組織的發(fā)育都有密切的關