細胞自噬調(diào)節(jié)造血干細胞靜息機制的初步探討.pdf

1、血液細胞來源于骨髓中極少數(shù)長期造血干細胞（又稱為多潛能造血干細胞）(long-term hematopoietic stem cells，LT-HSCs)。在骨髓中LT-HSC分化為短期造血干細胞(short-term HSCs， ST-HSCs)，ST-HSCs進一步分化為不同的造血前體細胞，最終分化為成熟血細胞。作為血細胞的“種子”，大部分LT-HSCs分布在封閉的骨髓組織，處于不增殖，不分化，不凋亡的靜息狀態(tài)(quiescence

2、)，而干擾LT-HSCs的靜息狀態(tài)，會引起造血干細胞的異常擴增，引起骨髓造血干細胞的衰竭(exhaustion)或者轉(zhuǎn)化為白血病干細胞，導致造血功能障礙。因此，維持LT-HSCs的靜息狀態(tài)，對維系骨髓的終生造血能力和應激反應能力有重要作用。
　　造血干細胞處于低氧的骨髓微環(huán)境(niche)。在低氧或者營養(yǎng)缺乏的條件下，細胞自噬(autophagy)通過分解衰老的細胞器和變性的生物大分子為細胞的生存提供物質(zhì)和能量支持。細胞自噬是真核

3、生物中進化保守的對細胞內(nèi)物質(zhì)進行周轉(zhuǎn)的重要過程。越來越多的研究表明，細胞自噬參與調(diào)節(jié)胚胎干細胞的增殖和分化、胚胎的生長和發(fā)育。但是，因為缺乏有效的動物和細胞模型，有關(guān)細胞自噬是否以及如何調(diào)節(jié)造血干細胞靜息狀態(tài)的機制還不清楚。在前期研究的基礎(chǔ)上，本文以造血干細胞系EML為模型，利用細胞生物學、分子生物學和遺傳學的技術(shù)方法，探討細胞自噬和造血干細胞狀態(tài)的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)細胞自噬參與調(diào)節(jié)造血干細胞的靜息狀態(tài)的維持以及靜息和增殖狀態(tài)的轉(zhuǎn)換。
　

4、　本文的主要結(jié)果包括:
　　1.在EML細胞系，成功分離兩個細胞亞群(LSKCD34-(CD34-)和LSKCD34+(CD34+))。證實CD34-細胞處于靜息狀態(tài)，CD34+細胞處于增殖狀態(tài)，并且兩群細胞相互轉(zhuǎn)換。
　　2.基因表達譜分析發(fā)現(xiàn)， CD34-和CD34+兩群細胞中細胞自噬相關(guān)基因及其上游轉(zhuǎn)錄因子的表達存在顯著差異，自噬相關(guān)基因的表達在CD34-細胞顯著高于比CD34+細胞。
　　3.細胞自噬激活劑ra