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文檔簡介
1、輪狀病毒(Rotavirus,RV)是引起全世界嬰幼兒和幼齡動物嚴(yán)重腹瀉的最重要、最常見的病原。在發(fā)展中國家,每年因RV感染發(fā)生中度和嚴(yán)重腹瀉以及死亡的兒童高達(dá)1887萬人;在發(fā)達(dá)國家,因RV感染造成的經(jīng)濟損失是一個不容忽視的問題。據(jù)估計美國每年就此一項的醫(yī)藥損失高達(dá)2億6千萬美元。鑒于RV危害嚴(yán)重且無有效的治療手段,世界衛(wèi)生組織(WHO)將RV疫苗列為最優(yōu)先發(fā)展的疫苗項目之一。我們對于新型RV疫苗的研究仍在探索之中。 植物生物
2、反應(yīng)器是一種安全和廉價的生物系統(tǒng)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,特別是植物遺傳工程的快速發(fā)展,人類可以通過自身的意愿設(shè)計和改造植物,高效的生產(chǎn)出廉價的人類生產(chǎn)和生活所需要的各種產(chǎn)品。這種植物反應(yīng)器的概念,尤其是利用植物生產(chǎn)藥用蛋白和工業(yè)化酶類的概念,以及植物直接作為口服疫苗的概念,漸漸受到人們的重視和慢慢被人們廣泛的接受。 本實驗嘗試?yán)脽煵葑鳛樯锓磻?yīng)器生產(chǎn)VP6蛋白。將密碼子優(yōu)化的VP6基因克隆到質(zhì)粒中,構(gòu)建植物表達(dá)載體pBI121
3、-V6(U)。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化煙草,經(jīng)卡那霉素(Kan)多重篩選,獲得抗性植株,對抗性植株提取DNA進行PCR分析,表明VP6基因已經(jīng)整合到煙草的基因組中。轉(zhuǎn)基因植株的western blot顯示pBl121-V6(u)的轉(zhuǎn)基因煙草可以有效的表達(dá)VP6蛋白。實驗結(jié)果表明,我們所構(gòu)建的重組輪狀病毒多表位具有一定的免疫原性。本研究為研制重組輪狀病毒抗原表位亞單位疫苗、轉(zhuǎn)基因植物口服疫苗提供一條新的途徑和方法,具有一定的理論意義和應(yīng)用前景
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