一、兔外周血內(nèi)皮祖細胞的分離培養(yǎng)、鑒定和體外標記;二、G-CSF對頸動脈狹窄模型兔內(nèi)皮祖細胞的動員作用.pdf_第1頁
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1、目的：研究新西蘭大白兔外周血內(nèi)皮祖細胞(Endothelial progenitor cells，EPCs)的分離、培養(yǎng)方法，對其進行功能鑒定，同時用增強型綠色熒光蛋白(Enhanced green fluorescent protein EGFP)對細胞進行標記示蹤，為后續(xù)實驗研究做好準備。 方法：①健康雄性新西蘭大白兔為研究對象，密度梯度法分離兔外周血單個核細胞(MNCs)，采用專用的EGM-2-MV完全培養(yǎng)基對單個核細胞進

2、行誘導分化培養(yǎng)，將其接種在人纖維連接蛋白包被培養(yǎng)板，動態(tài)觀察細胞生長過程。②通過DiL標記的乙?；兔芏戎鞍缀虵ITC標記的凝集素UEA-1雙染法鑒定血管內(nèi)皮祖細胞，顯示紅色熒光的為吞噬了乙酰化低密度脂蛋白的細胞，綠色熒光為結(jié)合UEA-1的細胞，雙染色為橙色熒光。③用攜帶綠色熒光蛋白基因的腺病毒液對培養(yǎng)7天細胞進行感染，用熒光顯微鏡觀察細胞綠色熒光蛋白表達情況。 結(jié)論：①從兔外周血中能成功地分離培養(yǎng)出具有血管內(nèi)皮祖細胞特征的細

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