丙戊酸鈉對骨髓增生異常綜合征細胞株MUTZ-1增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：研究丙戊酸鈉(VPA)對人骨髓增生異常綜合征(MDS)細胞株MUTZ-1細胞的抑制增殖和凋亡誘導作用，探討藥物作用的可能機制，并可為臨床MDS的治療提供一定的理論依據(jù)。 方法：采用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測VPA對細胞生長的抑制作用；采用光學顯微鏡和電子顯微鏡觀察VPA作用后細胞形態(tài)的變化；應(yīng)用流式細胞術(shù)(FCM)檢測不同濃度藥物作用后細胞凋亡的比例及細胞周期分布的變化；通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)和

2、Western blot印跡方法分別檢測藥物作用后p21<'WAF1>(細胞周期依賴性激酶抑制因子)在mRNA和蛋白質(zhì)水平表達量的改變。 結(jié)果：VPA對MUTZ-1細胞的生長抑制作用呈現(xiàn)時間和劑量依賴性。經(jīng)4mmol/L VPA處理MUTZ-1細胞72h后，細胞呈現(xiàn)典型的凋亡細胞的形態(tài)特征：光鏡下可見凋亡細胞胞體固縮、核固縮、核碎裂及凋亡小體；透射電鏡下可見凋亡細胞核染色質(zhì)邊集、胞漿濃縮、密度增加，漿內(nèi)可見大小不規(guī)則的染色質(zhì)團塊

3、。流式結(jié)果表明經(jīng)1、2和4mmol/L，VPA作用細胞72h后，細胞的凋亡率由處理前的(0.99±0.35)％分別上升為(3.14±0.87)％， (14.90±1.04)％， (22.46±1.74)％，與對照組相比差異顯著(P<0.05)；G<,0>-G<,1>期細胞比例逐漸增多，S期細胞比例逐漸減低，細胞被阻滯在G<,0>-G<,1>期(P<0.05)。RT-PCR和Western blot印跡技術(shù)均發(fā)現(xiàn)VPA作用MUTZ-1細胞