羥基喜樹堿誘導(dǎo)人骨髓增生異常綜合征MUTZ-1細(xì)胞凋亡及機(jī)理的研究.pdf

1、目的:研究羥基喜樹堿(HCPT)對(duì)人骨髓增生異常綜合征(MDS)細(xì)胞株MUTZ-1細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，探討藥物誘導(dǎo)凋亡的可能機(jī)制，并可為臨床MDS的治療提供一定的理論依據(jù)。 方法:采用MTT法研究HCPT對(duì)MUTZ-1細(xì)胞體外生長的抑制作用；流式細(xì)胞儀技術(shù)分析凋亡細(xì)胞量和細(xì)胞周期的改變；光鏡及透射電鏡觀察凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；半定量RT-PCR方法檢測(cè)生存素基因(Survivin)、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病基因2（Bcl-2)、B細(xì)胞

2、淋巴瘤/白血病基因2相關(guān)X蛋白基因（Bax)的mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果:1HCPT可抑制MUTZ-1細(xì)胞的生長，不同濃度藥物處理對(duì)細(xì)胞生長的抑制作用之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=10.24，p＜0.0001)；藥物處理不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞生長的抑制作用之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.78，p=0.009)。2HCPT可誘導(dǎo)MUTZ-1細(xì)胞株凋亡，不同濃度藥物處理后，細(xì)胞凋亡率之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=16.35，p＜0.0001)；藥物處理

3、不同時(shí)間后，細(xì)胞凋亡率之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=57.93，p＜0.0001)。3光鏡觀察可見凋亡細(xì)胞胞體固縮，核固縮，核染色質(zhì)碎裂。透射電鏡觀察，可見凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)凝聚、邊集，部分細(xì)胞核膜消失；細(xì)胞漿濃縮、密度增加，胞漿內(nèi)可見大小不規(guī)則的染色質(zhì)團(tuán)塊。4不同濃度HCPT處理24h，與空白對(duì)照組比較，S期細(xì)胞增多，細(xì)胞阻滯于S期(p＜0.05)。5在一定條件下，HCPT處理細(xì)胞不同時(shí)間后，Bcl-2、Bax基因表達(dá)量未見明顯變化(p＞0

4、.05)，Survivin基因表達(dá)量可見明顯下調(diào)(p＜0.05)；在一定條件下，不同濃度HCPT處理細(xì)胞后，Bcl-2、Bax基因表達(dá)量未見明顯變化(p＞0.05)，Survivin基因表達(dá)量可見下調(diào)趨勢(shì)(p＜0.05)。 結(jié)論:HCPT抑制MUTZ-1細(xì)胞的生長，呈劑量和時(shí)間的依賴性。HCPT可誘導(dǎo)MUTZ-1細(xì)胞凋亡，呈劑量和時(shí)間依賴性。光鏡及透射電鏡下可見典型凋亡細(xì)胞。HCPT誘導(dǎo)MUTZ-1細(xì)胞凋亡過程中可改變細(xì)胞周期，