羥基喜樹堿誘導人骨髓增生異常綜合征MUTZ-1細胞凋亡及機理的研究.pdf

1、目的:研究羥基喜樹堿(HCPT)對人骨髓增生異常綜合征(MDS)細胞株MUTZ-1細胞的凋亡誘導作用，探討藥物誘導凋亡的可能機制，并可為臨床MDS的治療提供一定的理論依據(jù)。 方法:采用MTT法研究HCPT對MUTZ-1細胞體外生長的抑制作用；流式細胞儀技術分析凋亡細胞量和細胞周期的改變；光鏡及透射電鏡觀察凋亡細胞形態(tài)學改變；半定量RT-PCR方法檢測生存素基因(Survivin)、B細胞淋巴瘤/白血病基因2（Bcl-2)、B細胞

2、淋巴瘤/白血病基因2相關X蛋白基因（Bax)的mRNA表達水平。 結果:1HCPT可抑制MUTZ-1細胞的生長，不同濃度藥物處理對細胞生長的抑制作用之間差別有統(tǒng)計學意義(F=10.24，p＜0.0001)；藥物處理不同時間對細胞生長的抑制作用之間差別有統(tǒng)計學意義(F=3.78，p=0.009)。2HCPT可誘導MUTZ-1細胞株凋亡，不同濃度藥物處理后，細胞凋亡率之間差別有統(tǒng)計學意義(F=16.35，p＜0.0001)；藥物處理

3、不同時間后，細胞凋亡率之間差別有統(tǒng)計學意義(F=57.93，p＜0.0001)。3光鏡觀察可見凋亡細胞胞體固縮，核固縮，核染色質(zhì)碎裂。透射電鏡觀察，可見凋亡細胞核染色質(zhì)凝聚、邊集，部分細胞核膜消失；細胞漿濃縮、密度增加，胞漿內(nèi)可見大小不規(guī)則的染色質(zhì)團塊。4不同濃度HCPT處理24h，與空白對照組比較，S期細胞增多，細胞阻滯于S期(p＜0.05)。5在一定條件下，HCPT處理細胞不同時間后，Bcl-2、Bax基因表達量未見明顯變化(p＞0

4、.05)，Survivin基因表達量可見明顯下調(diào)(p＜0.05)；在一定條件下，不同濃度HCPT處理細胞后，Bcl-2、Bax基因表達量未見明顯變化(p＞0.05)，Survivin基因表達量可見下調(diào)趨勢(p＜0.05)。 結論:HCPT抑制MUTZ-1細胞的生長，呈劑量和時間的依賴性。HCPT可誘導MUTZ-1細胞凋亡，呈劑量和時間依賴性。光鏡及透射電鏡下可見典型凋亡細胞。HCPT誘導MUTZ-1細胞凋亡過程中可改變細胞周期，