河北省乳源金黃色葡萄球菌耐藥性檢測(cè)及耐藥基因的研究.pdf

1、本試驗(yàn)主要研究河北省石家莊、保定、廊坊、承德、邢臺(tái)、張家口、唐山7個(gè)地區(qū)集約化奶牛場(chǎng)臨床分離的奶牛乳房炎病原菌-金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus S.A）的主要生物學(xué)特性、耐藥性及耐藥基因的相關(guān)性。通過(guò)細(xì)菌生化試驗(yàn)及PCR方法的鑒定，分離出109株乳源金黃色葡萄球菌，按照世界衛(wèi)生組織WHO推薦的Kirby-Bauer菌液涂布法對(duì)109株乳源金黃色葡萄球菌進(jìn)行了38種抗生素的藥物敏感試驗(yàn)，結(jié)果顯示:109株乳源金黃

2、色葡萄球菌對(duì)各類抗生素均有不同程度的耐藥，且均表現(xiàn)為多重耐藥，較為敏感的抗生素是頭孢菌素類和氨基糖苷類，其中以頭孢拉定、頭孢氨芐、慶大霉素、阿米卡星、頭孢吡肟、新霉素最為敏感;對(duì)磺胺類藥物、青霉素類、林可胺類、大環(huán)內(nèi)酯類和四環(huán)素類抗生素耐藥嚴(yán)重，其中以磺胺異惡唑、氨芐西林、甲氧胺嘧啶、復(fù)方新諾明、阿莫西林、強(qiáng)力霉素、紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素、林可霉素耐藥性最為嚴(yán)重。藥敏試驗(yàn)為河北省區(qū)域內(nèi)奶牛乳房炎的治療提供科學(xué)的用藥依據(jù)和用藥指南。此

3、外，本試驗(yàn)利用PCR技術(shù)對(duì)109株乳源金黃色葡萄球菌進(jìn)行了8類抗生素耐藥基因的檢測(cè)，結(jié)果如下:(1)磺胺類耐藥基因sul1、sul2、sul3陽(yáng)性率分別為45.87％、6.42％、1.83％，有55株細(xì)菌含有該類耐藥基因，總檢出率為50.46％，無(wú)同時(shí)攜帶三種耐藥基因的菌株;(2)四環(huán)素類耐藥基因tetA、tetB、tetC、tetM陽(yáng)性率分別為41.28％、18.35％、43.12％、10.09％，88株細(xì)菌擴(kuò)增出四環(huán)素類耐藥基因，總

4、分離率為80.73％，有1株攜帶4種耐藥基因，21株細(xì)菌未檢出;(3)氨基糖類耐藥基因aac(6')/aph(2")總檢出率為66.97％，另有36株細(xì)菌未攜帶該類耐藥基因;(4)β-內(nèi)酰胺類耐藥基因mecA的陽(yáng)性率為0％，而femA陽(yáng)性率分100％，推導(dǎo)試驗(yàn)菌株對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥機(jī)制主要是由femA基因介導(dǎo)的;(5)大環(huán)內(nèi)酯-林可胺類耐藥基因ermA和ermC的陽(yáng)性率分別為98.17％、62.39％，所有菌株均攜帶此類耐藥基因，

5、總檢出率為100％;(6)喹諾酮類耐藥基因norA，檢出率為59.26％，隨機(jī)選取30株耐喹諾酮類抗生素菌株，對(duì)其進(jìn)行g(shù)rlA與gyrA基因QRDR序列的檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，grlA基因編碼的第80位氨基酸發(fā)生突變，gyrA基因編碼的第84位氨基酸發(fā)生突變，且有16株發(fā)生了gyrA和grlA雙突變;(7)氯霉素類耐藥基因cmlA、cat1、flor其對(duì)應(yīng)的陽(yáng)性率分別為0％、22.02％、33.03％，未帶任何氯霉素類耐藥基因的菌株有55株，