牛源金黃色葡萄球菌耐藥性分析及氟喹諾酮類耐藥基因檢測.pdf

1、金黃色葡萄球菌(StaphylococcusAureus，SA)是醫(yī)學和獸醫(yī)臨床上最常見的病原菌，可引起人和家畜的多種疾病。隨著抗菌藥物的廣泛應用以至濫用，金黃色葡萄球菌對所有抗菌藥物的耐藥性及其多重耐藥性已嚴重影響了獸醫(yī)臨床抗感染的治療，因而對本地區(qū)牛源金黃色葡萄球菌進行耐藥性分析及耐藥性分子流行病學的調查，不僅對金黃色葡萄球菌引起的疾病防治具有指導意義，而且有利于控制耐藥菌株的產生和傳播。
　　本研究采集了寧夏地區(qū)部分奶牛養(yǎng)殖

2、場臨床型和隱性型乳房炎奶樣，利用微生物學方法和分子生物學方法，對樣品中的金黃色葡萄球菌進行分離鑒定。結果，從1263份樣品中分離鑒定出了227株金黃色葡萄球菌，分離率為17.97％，同時采用PCR方法對分離鑒定的金黃色葡萄球菌進行16SrDNA、nuc基因擴增，從基因水平進行確證，結果有220株金黃色葡萄球菌的16SrDNA、nuc基因為陽性，陽性率為17.42％，即本研究中微生物學鑒定與PCR方法鑒定的相符率為96.92％。
　

3、　依據CLSI推薦的紙片法對分離的220株金黃色葡萄球菌進行了藥物敏感性測定。結果顯示，金黃色葡萄球菌對青霉素和氨芐西林的耐藥率最高，達到了83.18％，其次是氧氟沙星(56.37％)、阿莫西林/克拉維酸(51.82％)、環(huán)丙沙星(49.55％)，耐藥率在50％左右，對奎奴普丁/達福普丁等其他藥物的耐藥率從7.27％-40.5％不等，耐藥率最低的是美羅培南，耐藥率為2.27％，對萬古霉素完全敏感，所有分離的菌株最多對13種藥物耐藥，其中

4、6耐菌株最多，占到12.73％。
　　采用苯唑西林紙片擴散法檢測MRSA，結果檢測出2株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌，9株菌位于耐藥和敏感菌之間，然后采用PCR法擴增所有菌的mecA基因和femA基因，發(fā)現除了MRSA陽性菌(ATCC33591)的mecA基因擴增出了與目的片段相符的DNA片段以外，被檢的220株菌中只有2株菌的mecA基因為陽性，檢出率為0.91％，所檢的220株菌的femA基因均擴增出了與目的片段相符的DNA片段，

5、陽性率為100％，即本次研究只檢測出2株MRSA菌株。
　　最后采用PCR法檢測了耐氟喹諾酮金黃色葡萄球菌grlA、gyrA、norA基因，結果顯示，gyrA基因檢出率為80％，norA基因檢出率為78.18％，grlA基因檢出率為78.64％。選取部分擴增產物進行測序，測序結果顯示grlA、norA基因的同源性為99％，gyrA基因的同源性為100％。
　　綜上所述，本研究通過對寧夏地區(qū)奶牛乳房炎金黃色葡萄球菌耐藥性分析和