積雪草苷及其類似物的吸收和代謝性質(zhì)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)室在活性篩選階段發(fā)現(xiàn)積雪草苷具有新的藥理活性，初步研究顯示其口服生物利用度很低。本研究采用體外、體內(nèi)、在體和計(jì)算機(jī)預(yù)測(cè)等手段對(duì)積雪草苷及其類似物的吸收、代謝性質(zhì)進(jìn)行研究，以期闡明積雪草苷生物利用度低的原因，并指導(dǎo)進(jìn)一步的開發(fā)。 方法: 1．HPLC法檢測(cè)積雪草苷的溶解度和LogD值，軟件預(yù)測(cè)積雪草苷的piti值和LogP值。 2．MTT法檢測(cè)樣品對(duì)Caco一2細(xì)胞和MDCK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，MTT法和L

2、DH法檢測(cè)樣品對(duì)大鼠原代肝細(xì)胞的毒性。 3．運(yùn)用在體單向灌流模型研究大鼠腸道對(duì)積雪草苷和積雪草酸的吸收，求得有效滲透系數(shù)Pm；使用MDCK細(xì)胞模型檢測(cè)各化合物轉(zhuǎn)運(yùn)的表觀滲透系數(shù)Papp。 4．制備大鼠原代肝細(xì)胞和大鼠肝臟微粒體，研究肝臟中代謝酶對(duì)積雪草苷的作用；制備大鼠腸道細(xì)菌的分泌酶溶液，以TLC法和LC-MS法檢測(cè)體外實(shí)驗(yàn)代謝產(chǎn)物，LC-MS法檢測(cè)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)大鼠尿、血中的代謝產(chǎn)物。 結(jié)果: 1．積雪草苷

3、在水溶液中極微溶解；各PH值下的LogD值在O．44至0．48之間；軟件預(yù)測(cè)各羥基piti值均在12以上，LogP值為1．07；僅油水分配系數(shù)沒(méi)有違反“五律”。 2．積雪草苷和羥基積雪草苷對(duì)Caco-2細(xì)胞、MDCK細(xì)胞和原代肝細(xì)胞在測(cè)定濃度范圍內(nèi)無(wú)生長(zhǎng)抑制作用，積雪草酸對(duì)和羥基積雪草酸在高濃度時(shí)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。 3．大鼠的各個(gè)腸段對(duì)積雪草苷的吸收均較低，最高Peff為6．43×10％m／s，吸收機(jī)制為被動(dòng)轉(zhuǎn)

4、運(yùn)，抑制P一糖蛋白不能使吸收明顯增加，苷元積雪草酸在結(jié)腸段吸收程度較高，最高Peff為34.5×10％m／s；在MDCK細(xì)胞模型中，積雪草苷最高Papp為2.47×10-6cm／s，苷元積雪草酸最高為5．92×10-acm／s。 4．積雪草苷在大鼠肝微粒體和肝細(xì)胞中的代謝穩(wěn)定性很高；口服積雪草苷90％以上以苷元形式排出體外，積雪草苷可被大鼠腸內(nèi)菌群代謝生成三個(gè)代謝產(chǎn)物，原形物和代謝產(chǎn)物均為吸收入血成分。 結(jié)論:積雪草苷在