番茄紅素對(duì)腦缺血再灌注大鼠氧化應(yīng)激及缺氧損傷的影響.pdf

1、目的：腦卒中是人類致殘和死亡的重要原因之一，大量研究表明，氧化應(yīng)激在腦缺血后神經(jīng)元的繼發(fā)損傷中起到了關(guān)鍵作用。番茄紅素(lycopene，LP)是膳食中的一種抗氧化成分。近年來，LP對(duì)心腦血管的保護(hù)作用越來越受到關(guān)注。本研究旨在從氧化應(yīng)激和缺氧損傷兩個(gè)方面觀察番茄紅素對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦組織的保護(hù)作用并探討其可能機(jī)理。
　　方法：
　　1.大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(middle cerebral artery occlusion，

2、MCAO)模型的建立
　　260-280g雄性健康SD大鼠20只，按體重隨機(jī)分成4組，每組5只。制作模型時(shí)A、B、C、D組插入的栓線直徑分別為0.22mm、0.24mm、0.26mm、0.28 mm。MCAO模型手術(shù)操作參照改良Zea Longa法。根據(jù)各組大NMCAO模型成功率探索最適合模型栓塞效果的栓線直徑。
　　2.番茄紅素對(duì)腦缺血再灌注大鼠氧化應(yīng)激及缺氧損傷的緩解作用
　　130-140 g SPF級(jí)雄性健康S

3、D大鼠64只，按體重隨機(jī)分為番茄紅素高劑量組(LPH)、番茄紅素低劑量組(LPL)、模型對(duì)照組(Model)各16只，假手術(shù)組(SHAM)10只和正常對(duì)照組(Nor)6只。LPH、LPL組大鼠每日分別以20、5 mg/kg.bw番茄紅素灌胃，Model組、SHAM組大鼠給予等量色拉油。灌胃15d后，Model組、LPL組和LPH組實(shí)施MCAO手術(shù)造模，缺血2h后進(jìn)行再灌注；SHAM組施予假手術(shù)。術(shù)后禁食24h。分別于再灌注3h、24h后

4、對(duì)各組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能行為評(píng)分；再灌注24h后計(jì)算腦梗死體積，測(cè)定腦皮質(zhì)組織超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)、過氧化氫酶(Catalase，CAT)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、活性氧(Reactive Oxygen Species，ROS)、一氧化氮(Nitricoxide，NO)、一氧化氮合成酶(Nitricoxide Synthase NOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(Indu

5、cibleNOS，iNOS)、乳酸(Lactic Acid，LD)及乳酸脫氫酶(LactateDehydrogenase，LDH)的含量或活性，以及血清尿酸(Uric Acid，UA)水平；并采用RT-PCR法檢測(cè)腦皮質(zhì)及海馬組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α(Hypoxia-InducibleFactor-1α，HIF-1α)mRNA、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphomaAeukemia-2，Bcl-2)mRNA的表達(dá)水平。

6、
　　結(jié)果：
　　1.MCAO模型成功大鼠出現(xiàn)明顯的Homer體征，其中B組(直徑0.24 mm)大廈模型成功率最高；D組(直徑0.28 mm)大鼠死亡率最高；A組(直徑0.22 mm)、及C組(直徑0.26 ram)大鼠因栓塞不完全和腦出血率較高，模型成功率均較低。
　　2.(1)LP對(duì)大鼠神經(jīng)功能評(píng)分、腦梗死體積及腦指數(shù)的影響：LPH組、LPL組再灌注3h、24h神經(jīng)評(píng)分及腦梗死體積均低于Model組(P<0.05

7、)，且LPH組腦梗死體積低于LPL組(P<0.05)；LPH、LPL及Model組腦指數(shù)均高于SHAM組及Nor組，LPH組腦指數(shù)較Model組降低，差異均有顯著性意義(P<0.05)。(2)LP對(duì)腦缺血再灌注24h后氧化應(yīng)激的影響：LPH、LPL組大鼠缺血側(cè)腦皮質(zhì)MDA、ROS及血清UA水平分別為(1.01±0.08 nmol/mgprot.114.23±8.91 Fluounit/gprot，154.56±15.39 umol/L)

8、，(1.09±0.05 nmol/mgprot，135.89±14.17 Fluo unit/gprot，164.42±14.76 umol/L)，與Model組相比均下降(P<0.05)；LPH、LPL組大鼠缺血側(cè)臍皮質(zhì)CAT活性分別為(1.20±0.11 U/mgprot)，(1.08±0.15 U/mgprot)，LPH組SOD活性為(13.88±0.91 U/mgprot)，均高于Model組(P<0.05)。(3)LP對(duì)腦缺血

9、再灌注24h后繼發(fā)炎癥反應(yīng)及缺氧損傷的影響：LPH、LPL組、Model組大鼠缺血側(cè)腦皮質(zhì)NO含量和NOS、iNOS活性分別為(6.60±0.771amol/gprot，0.817±0.016 U/mg prot，0.502±0.022 U/mgprot)，(7.13±0.47μmol/gprot，0.875±0.095U/mgprot，0.523±0.039 U/mgprot)，(8.38±0.80μmol/gprot，1.030±0

10、.101 U/mgprot，0.612±0.030 U/mgprot)，與SHAM組和Nor組比較均升高(P<0.05)；而LP各組NO、LD含量及NOS、iNOS活性均較Model組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(4)LP對(duì)腦缺血再灌注24h后大鼠缺血側(cè)腦組織HIF-1α mRNA、Bcl-2 mRNA表達(dá)水平的影響：HIF-1α mRNA：Model組大鼠腦皮質(zhì)和海馬組織HIF-1αmRNA表達(dá)較SHAM、Nor組升高(P

11、<0.05)，而LPH組腦皮質(zhì)及LPH、LPL組腦馬組織中HIF-1αmRNA的表達(dá)均高于Model組(P<0.05)；Bcl-2 mRNA：Model組大鼠腦皮質(zhì)和海馬組織Bcl-2 mRNA的表達(dá)均較SHAM組降低(P<0.05)，而LPL組腦皮質(zhì)及LPH、LPL組海馬組織Bcl-2 mRNA的表達(dá)較Model組均升高(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.260～280g體重的SD大鼠用直徑為0.24 mm的栓線進(jìn)行M