易達(dá)拉奉對(duì)大鼠腦缺血再灌注后核因子κB及半胱天冬酶-3的影響.pdf

1、目的；易達(dá)拉奉(Edaravone)是日本三菱公司開(kāi)發(fā)的一個(gè)新型治療腦梗塞的自由基清除劑，它是捕獲羥自由基(·OH)的活性抗氧劑。易達(dá)拉奉作為治療急性腦血管病的一個(gè)新藥，本試驗(yàn)通過(guò)觀察此藥對(duì)大鼠腦缺血再灌注后梗塞面積，神經(jīng)功能缺損程度，清除羥自由基能力及核因子κB、半胱天冬酶-3表達(dá)的影響，探討它的保護(hù)作用及作用機(jī)制。核因子κB(nuclearfactor-κBNF-κB)是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，參與許多基因的表達(dá)調(diào)控，是炎癥介質(zhì)的中心環(huán)

2、節(jié)。而半胱天冬酶-3(Caspase-3)是凋亡執(zhí)行蛋白，在凋亡調(diào)控程序中居中心地位，它的啟動(dòng)注定細(xì)胞必定死亡，被稱為凋亡蛋白。通過(guò)觀察易達(dá)拉奉對(duì)大鼠腦缺血再灌注后NF-κB和Caspase-3的變化，進(jìn)一步了解自由基清除劑對(duì)Caspase-3及NF-κB的影響及其保護(hù)機(jī)制。 方法；Wistor雌、雄性大鼠共66只，隨機(jī)分為假手術(shù)組，鹽水對(duì)照組及易達(dá)拉奉用藥組，對(duì)照組及用藥組再進(jìn)一步分為6h、24h、48h，根據(jù)Koizumi線

3、栓法建立大鼠左側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型(MCAO)。用神經(jīng)功能缺損等級(jí)評(píng)分法觀察缺血再灌注后的行為功能的變化，TTC染色法檢測(cè)大腦梗塞積百分比，羥自由基試劑盒檢測(cè)羥自由基的含量，及用免疫組化方法檢測(cè)NF-κB和Caspase-3的蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果1、大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分結(jié)果鹽水對(duì)照組大鼠麻醉清醒后均出現(xiàn)右前肢無(wú)力，身體向右側(cè)旋轉(zhuǎn)或行走時(shí)向右側(cè)傾倒，或不能自行行走。神經(jīng)功能缺損評(píng)分為假手術(shù)組均為0分。6h時(shí)，對(duì)照組為1.6

4、5±0.18分，用藥組1.24±0.18分，P＜0.01；24h時(shí)，對(duì)照組為2.72±0.20分，用藥組1.74±0.20分，P＜0.01；48h時(shí)，對(duì)照組為2.78±0.27分，用藥組1.49±0.17s分，P＜0.01。 2、鼠腦大體形態(tài)及TTC染色結(jié)果缺血后，鹽水組缺血側(cè)鼠腦腫脹，有明確的梗塞灶，呈蒼白色，與MCAO支配的腦區(qū)域一致，未缺血部分呈粉紅色。而用藥組鼠腦腫脹明顯減輕，梗塞灶較鹽水組明顯減少。 3、羥自由

5、基檢測(cè)結(jié)果用羥自由基試劑盒分別檢測(cè)缺血2h再灌注48h鹽水組大鼠缺血側(cè)腦組織分別為勻漿0.418±0.017、胞漿0.283±0.022、和線粒體0.780±0.065，用藥組鼠腦缺血側(cè)羥自由基的含量分別為勻漿0.195±0.009*、胞漿0.216±0.024、及線粒體0.483±0.057。用藥組羥自由基含量較鹽水組明顯減少P＜0.01。 4、鼠腦缺血再灌注后缺血區(qū)腦組織NF-κB蛋白的表達(dá)假手術(shù)組幾乎無(wú)NF-κB蛋白的表達(dá)

6、，鹽水組NF-κB蛋白表達(dá)6h開(kāi)始升高，于24h達(dá)到高峰并于48h開(kāi)始下降。6h時(shí)，用藥組NF-κB蛋白表達(dá)較鹽水組減少，但差異不明顯P＞0.05；24h時(shí)，用藥組較鹽水組明顯減少P＜0.01；48h時(shí)，用藥組NF-κB蛋白表達(dá)較鹽水組減少，仍有明顯差異P＜0.05。 5、鼠腦缺血再灌注后缺血區(qū)腦組織Caspase-3蛋白的表達(dá)假手術(shù)組幾乎無(wú)Caspase-3蛋白的表達(dá)，鹽水組Caspase-3蛋白表達(dá)6h開(kāi)始升高，于24h達(dá)到