EGFR酪氨酸激酶抑制劑的設計、合成及生物活性篩選和類藥性化合物庫的構建.pdf

1、惡性腫瘤作為全球最大的公共衛(wèi)生問題，成為嚴重威脅人類健康的常見病和多發(fā)病。研究表明，EGFR在多種不同的腫瘤中都存在過渡表達，其在細胞的增殖中起著十分重要的作用，因此是極具潛力的抗腫瘤藥物靶點之一。近些年，針對EGFR的靶向藥物開發(fā)取得了令人鼓舞的成績。以EGFR為靶點的第一代EGFR抑制劑Gefitinib、Erlotinib、Icotinib以及第二代EGFR抑制劑Afatinib已經(jīng)被批準用于臨床治療非小細胞肺癌。由于腫瘤是一種復

2、雜的疾病，是由多種遺傳和分子的改變影響了細胞的增殖、存活和分化的疾病。隨著分子生物學技術的進展和從細胞受體與增生調(diào)控的分子水平對腫瘤發(fā)病機制認識的進一步深入，人們發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展并不是僅僅依賴于一種受體或一種信號通路而且信號通路之間相互交錯，單靶點TKI已難以達到理想的阻斷腫瘤細胞發(fā)生發(fā)展和對特定腫瘤的治療，而針對多靶點抑制劑可能取得更大療效。目前，多靶點受體酪氨酸激酶抑制劑已經(jīng)成為新的研究趨勢。其中葛蘭素-史克公司開發(fā)的拉帕替尼是可

3、逆性EGFR和HER2雙重抑制劑，已經(jīng)被FDA批準上市，用于治療乳腺癌。由于多靶點受體酪氨酸激酶抑制劑能作用于多個靶點，相對于兩個單靶點藥物的聯(lián)合應用，可以避免藥物的相互作用，減少副反應，治療效率高，安全性好，病人依從性好。
　　本文對臨床上的小分子受體酪氨酸激酶抑制劑的構效關系以及文獻報道的配體-受體結合模型進行綜述，同時也對近些年文獻報道的鐵離子螯合劑的抗腫瘤活性進展進行了綜述。在此基礎上設計合成了兩類含含3-羥基-4-吡啶酮

4、片段的4-芳胺基喹唑啉類衍生物。該部分工作的創(chuàng)新點是在傳統(tǒng)的喹唑啉母核的7-位或者6-位引入了3-羥基-4-吡啶酮片段。而3-羥基-4-吡啶酮片段是一類已知的鐵離子螯合片段，有望開發(fā)出一類結構新穎并且擁有自主知識產(chǎn)權的多靶點受體酪氨酸激酶抑制劑，所有合成的目標化合物均經(jīng)過了1H NMR、HPLC-HRMS和熔點表征。對所設計的化合物進行體外腫瘤細胞篩選，發(fā)現(xiàn)大部分化合物對EGFR高表達的人表皮癌細胞株A431WT, overexpres

5、sion有較好的增殖抑制活性;所設計的化合物對Gefitinib耐藥的人非小細胞肺癌細胞株H1975L858R/T790M也有一定的增殖抑制活性。我們進一步考察了所設計的化合物在人宮頸癌Hela細胞株上的活性，發(fā)現(xiàn)化合物都有較好的增殖抑制活性。我們從中選取部分化合物進行激酶活性考察，發(fā)現(xiàn)化合物EGFRWT激酶、突變型EGFRL858R激酶同樣表現(xiàn)出較好的抑制活性，但是在突變型EGFRT790M激酶上的抑制活性較弱。此外，我們選取的苗頭化

6、合物在EGFR低表達的細胞株SW620上增殖抑制活性較差。體外Cysteine捕獲實驗和Western Blotting洗脫實驗也證實了該類化合物不能與Cysteine發(fā)生共價結合。這樣的結果預示著該類化合物為可逆型多靶點受體酪氨酸激酶抑制劑。所合成的化合物后續(xù)成藥性評價也正在進行中?；衔飵斓母咄亢Y選依然是新藥發(fā)現(xiàn)的主要途徑之一，含氮雜環(huán)在已上市的藥物中占有很大的比例，因此數(shù)量巨大的含氮雜環(huán)化合物庫對于發(fā)現(xiàn)先導化合物具有極其重要的意

7、義。論文第三部分，利用常規(guī)化學方法和新的化學方法構建了8類共計655個結構全新的化合物。其中對于噻唑類衍生化合物庫和含鐵離子螯合片段的芳基脲類衍生物化合物庫，我們對其進行了對應的體外腫瘤細胞活性篩選。發(fā)現(xiàn)了先導化合物。對于多取代苯胺類化合物庫和2-氨基咪唑類化合物庫，我們開發(fā)出新的化學合成方法。對含糖片段的鐵離子螯合劑化合物庫，我們詳細考察了其與鐵離子的親和能力以及透過血腦屏障的能力。在本論文中，我們選取其中四個化合物庫進行介紹。8個化