新型ErbB2受體酪氨酸激酶抑制劑合成及其活性測試.pdf

1、上皮生長因子受體激酶ErbB2是由位于染色體長臂17(17q21)的原癌基因erbB2基因編碼的膜蛋白，其相對分子質量(Mr)為185.0×103，具有酪氨酸激酶活性。ErbB2是信號轉導通路上游的關鍵信號蛋白，它可以通過多種信號途徑維持和調控器官的生理活性。在正常細胞中由活化的ErbB2觸發(fā)的信號通過信號轉導網控制著細胞生長、分化、粘附等。在多種腫瘤細胞中都發(fā)現ErbB2的過度表達，并且研究已證實ErbB2的表達狀態(tài)與乳腺癌的病理特征

2、存在一定聯系。統(tǒng)計發(fā)現在許多上皮腫瘤，25％-30％乳腺癌、25％-32％卵巢癌、部分前列腺癌、小細胞肺癌和鼻咽癌中可見到ErbB2過度表達。其過表達與腫瘤發(fā)展，耐藥相關，也是腫瘤患者預后不良和死亡率高的部分原因。 近年來研究發(fā)現，1，2，3-三氮唑類化合物能選擇性地與ErbB2結合，可逆地抑制ErbB2受體酪氨酸激酶的磷酸化。該化合物有明顯的靶向性和顯著的抑制腫瘤細胞生長的活性，這促使我們對該類化合物的合成和活性進行了初步的研

3、究。本論文的兩個部分是：探索1，2，3-三氮唑類化合物的合成；目標合物部分理化性質和其抗腫瘤活性的研究。 第一部分三氮唑的合成 以取代肉桂酸為原料，設計出1，2，3-三氮唑的合成途徑，采用相應的化學反應和處理、分離方法獲得目標化合物。 方法依照設計好的兩條合成路線，采用經典酰胺脫水法和末端炔氰化法合成出苯丙炔氰，疊氮鈉和炔鍵經過1，3偶極加成得5-苯基-4-氰基-1H-1,2,3-三氮唑。并用1H-NMR、IR、

4、MS對目標化合物驗證。 結果：構建了兩種1，2，3-三氮唑的合成途徑，并由此比較得出一條高效簡便的合成方法，如Scheme1所示。 Scheme1高效簡便的1,2,3-三氮唑合成方法 最終合成了12個1，2，3-三氮唑類化合物，其中8個化合物未見報道，所有的目標化合物都經1H-NM、IR、MS驗證。 結論：目標化合物的合成采用肉桂酸系列衍生物為原料，因肉桂酸衍生物含有的取代基種類多、價格低廉；采用Sche

5、me1，中間反應也能得到很好的收率；該方法可作為1,2,3-三氮唑的常規(guī)合成方法。三氮唑合成方法成功的建立，為對三氮唑進一步研究和應用奠定了基礎，增加三氮唑類化合物實際應用意義。 第二部分目標化合物活性測試與構效關系分析 用乳腺癌細胞株MDA453對所合成的目標化合物進行ErbB2磷酸化抑制活性測試，測定目標化合物的脂水分配系數，并建立構效關系Hansch方程。 方法采用Westernblot法進行活性測試，搖瓶

6、法測定化合物在正丁醇和水體系中的脂水分配系數，用SAS軟件回歸建立Hansch方程。 結果所有目標化合物都具有不同程度的ErbB2磷酸化抑制活性，其中化合物4k活性最高，IC50值為6.6μM。測定了在正丁醇和水體系中酯水分布系數，并根據活性和酯水分布系數分析了構效關系。通過回歸得到的Hansch方程如下： log(1/IC50)=a(1og10P)2+blog10P+ρσ=-0.027(±0.072)(1og10P)2