新型ErbB2受體酪氨酸激酶抑制劑合成及其活性測試.pdf

1、上皮生長因子受體激酶ErbB2是由位于染色體長臂17(17q21)的原癌基因erbB2基因編碼的膜蛋白，其相對分子質(zhì)量(Mr)為185.0×103，具有酪氨酸激酶活性。ErbB2是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上游的關(guān)鍵信號蛋白，它可以通過多種信號途徑維持和調(diào)控器官的生理活性。在正常細(xì)胞中由活化的ErbB2觸發(fā)的信號通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)控制著細(xì)胞生長、分化、粘附等。在多種腫瘤細(xì)胞中都發(fā)現(xiàn)ErbB2的過度表達，并且研究已證實ErbB2的表達狀態(tài)與乳腺癌的病理特征

2、存在一定聯(lián)系。統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)在許多上皮腫瘤，25％-30％乳腺癌、25％-32％卵巢癌、部分前列腺癌、小細(xì)胞肺癌和鼻咽癌中可見到ErbB2過度表達。其過表達與腫瘤發(fā)展，耐藥相關(guān)，也是腫瘤患者預(yù)后不良和死亡率高的部分原因。 近年來研究發(fā)現(xiàn)，1，2，3-三氮唑類化合物能選擇性地與ErbB2結(jié)合，可逆地抑制ErbB2受體酪氨酸激酶的磷酸化。該化合物有明顯的靶向性和顯著的抑制腫瘤細(xì)胞生長的活性，這促使我們對該類化合物的合成和活性進行了初步的研

3、究。本論文的兩個部分是：探索1，2，3-三氮唑類化合物的合成；目標(biāo)合物部分理化性質(zhì)和其抗腫瘤活性的研究。 第一部分三氮唑的合成 以取代肉桂酸為原料，設(shè)計出1，2，3-三氮唑的合成途徑，采用相應(yīng)的化學(xué)反應(yīng)和處理、分離方法獲得目標(biāo)化合物。 方法依照設(shè)計好的兩條合成路線，采用經(jīng)典酰胺脫水法和末端炔氰化法合成出苯丙炔氰，疊氮鈉和炔鍵經(jīng)過1，3偶極加成得5-苯基-4-氰基-1H-1,2,3-三氮唑。并用1H-NMR、IR、

4、MS對目標(biāo)化合物驗證。 結(jié)果：構(gòu)建了兩種1，2，3-三氮唑的合成途徑，并由此比較得出一條高效簡便的合成方法，如Scheme1所示。 Scheme1高效簡便的1,2,3-三氮唑合成方法 最終合成了12個1，2，3-三氮唑類化合物，其中8個化合物未見報道，所有的目標(biāo)化合物都經(jīng)1H-NM、IR、MS驗證。 結(jié)論：目標(biāo)化合物的合成采用肉桂酸系列衍生物為原料，因肉桂酸衍生物含有的取代基種類多、價格低廉；采用Sche

5、me1，中間反應(yīng)也能得到很好的收率；該方法可作為1,2,3-三氮唑的常規(guī)合成方法。三氮唑合成方法成功的建立，為對三氮唑進一步研究和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)，增加三氮唑類化合物實際應(yīng)用意義。 第二部分目標(biāo)化合物活性測試與構(gòu)效關(guān)系分析 用乳腺癌細(xì)胞株MDA453對所合成的目標(biāo)化合物進行ErbB2磷酸化抑制活性測試，測定目標(biāo)化合物的脂水分配系數(shù)，并建立構(gòu)效關(guān)系Hansch方程。 方法采用Westernblot法進行活性測試，搖瓶

6、法測定化合物在正丁醇和水體系中的脂水分配系數(shù)，用SAS軟件回歸建立Hansch方程。 結(jié)果所有目標(biāo)化合物都具有不同程度的ErbB2磷酸化抑制活性，其中化合物4k活性最高，IC50值為6.6μM。測定了在正丁醇和水體系中酯水分布系數(shù)，并根據(jù)活性和酯水分布系數(shù)分析了構(gòu)效關(guān)系。通過回歸得到的Hansch方程如下： log(1/IC50)=a(1og10P)2+blog10P+ρσ=-0.027(±0.072)(1og10P)2