含（亞）砜類結(jié)構(gòu)的新型蛋白酪氨酸激酶抑制劑的設(shè)計合成與活性評價研究.pdf

1、目的：隨著酪氨酸激酶抑制劑的抗腫瘤作用不斷被認(rèn)識，蛋白酪氨酸激酶成為現(xiàn)代腫瘤治療的重要靶點之一。研究發(fā)現(xiàn)抗輻射藥物Ex-Rad具有一定的酪氨酸激酶抑制活性，本論文以Ex-Rad為先導(dǎo)化合物，設(shè)計合成含有（亞）砜類結(jié)構(gòu)的新化合物，并對其抑酶活性進行初步評價，篩選出具有一定PTK抑制活性和自主知識產(chǎn)權(quán)的新型酪氨酸激酶抑制劑。
　　方法：
　　1.查閱文獻資料，運用藥物化學(xué)中的生物電子等排原理，結(jié)合有效活性結(jié)構(gòu)的基本規(guī)律，合理改變

2、部分片段，進行化合物的結(jié)構(gòu)設(shè)計。
　　2.以不同取代基取代的氯（溴）芐為起始原料，與巰基乙酸進行親核取代，再經(jīng)30％雙氧水氧化（控制反應(yīng)溫度、時間）分別得到砜和亞砜，最后在縮合劑的作用下，與取代的水楊醛進行縮合反應(yīng)，經(jīng)過柱層析分離或重結(jié)晶純化得到第一類目標(biāo)化合物；以鄰羥基苯乙酸/5-氟-2羥基苯乙酸為起始原料，與肼基甲酸乙酯縮合反應(yīng)，在氯化亞砜作用下成環(huán)，再與不同取代的氯（溴）芐反應(yīng)生成硫醚，最后在不同溫度、不同量雙氧水條件下反應(yīng)

3、，經(jīng)分離純化，分別得到純凈的含砜類結(jié)構(gòu)和亞砜類結(jié)構(gòu)的第二類化合物。
　　3.采用聯(lián)酶免疫法進行抑酶活性的測定。實驗分為空白對照、陰性對照、陽性對照、溶媒對照以及受試藥物五個組，Ex-Rad為陽性藥，DMSO為溶媒。激酶反應(yīng)條件為37oC，孵育30 min，提取物蛋白濃度為11.2 mg·mL-1，稀釋至50μg·mL-1，使用量為50μl，標(biāo)記單克隆抗體稀釋倍數(shù)為2000。測定在濃度分別為100μmol·L-1和1 mmol·L-

4、1時，目標(biāo)化合物對酪氨酸激酶的抑制活性，并與Ex-Rad進行比較，分析構(gòu)效關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.本研究設(shè)計并合成了兩大類五組化合物:WT組（36個）、N組（30個）、BR組（29個）、FN組（22個）和TF組（22個），共計139個目標(biāo)化合物，其中2個已知化合物，137個新化合物，并合成了多個重要中間體，獲得了相應(yīng)的理化常數(shù)，結(jié)構(gòu)經(jīng)1H-NMR確證。
　　2.活性評價結(jié)果表明在濃度為100μmol·L-1和1 m

5、mol·L-1時，絕大部分目標(biāo)化合物都有一定的酪氨酸激酶抑制活性。第一類化合物中，WT002~WT004，WT007，WT009，WT011，WT014，WT018，WT019，WT021，WT029，WT034，N005，N009~N012，N014~N020，N025~N032，BR01，BR02，BR08~BR10，BR24等39個化合物在兩個濃度的抑制活性均高于陽性藥Ex-Rad，顯示出了較強的活性。第二類化合物中，濃度為100