新型蛋白酪氨酸激酶抑制劑(ZHT系列化合物)的研究.pdf

1、目的：腫瘤是威脅人類健康的惡性疾病，其發(fā)生多與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常密切相關(guān)。蛋白酪氨酸激酶通過將蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸化，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)和放大，常在腫瘤細(xì)胞中過度表達(dá)。本研究在已報(bào)道具有蛋白酪氨酸激酶抑制活性的黃酮類結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，設(shè)計(jì)并合成了一系列化合物，并對其藥理活性進(jìn)行初步測定，旨在發(fā)現(xiàn)新的抗腫瘤藥物。
　　 方法：1.通過對不同來源的蛋白酪氨酸激酶進(jìn)行立體結(jié)構(gòu)的疊合，選取1XKK、1AGW、1PKG、1Y6A、10

2、EC和20J9作為對接受體；基于黃酮類結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)了一系列小分子結(jié)構(gòu)(代號為ZHT002～ZHT011)，選擇已上市的蛋白酪氨酸激酶抑制劑lapatinib、dasatinib、imatinib、sunitinib、sorafenib和dovitinib作為陽性配體，選擇無抗腫瘤活性的zanamivir、linezolid、aspirin、ritonavir和cephalosporins作為陰性配體。利用計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)軟件Gold3.0

3、.1和Glide7.5.112的分子對接方法，計(jì)算了小分子配體與受體的結(jié)合能力，為確定目標(biāo)分子提供理論基礎(chǔ)。2.通過化學(xué)合成實(shí)驗(yàn)得到目標(biāo)化合物，以核磁共振進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證。3.在人早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞、人胃腺癌SGC-7901細(xì)胞、人結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞和人乳腺癌MCF-7細(xì)胞等體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞株上，采用常規(guī)MTT方法，以細(xì)胞生長抑制率及半數(shù)抑制濃度(IC50)為指標(biāo)初步測定化合物的活性。
　　 結(jié)果：1.分子對接結(jié)果

4、顯示：陽性配體與各受體對接評分和結(jié)合能都較好，大部分ZHT分子與各受體都有很好的結(jié)合能力，存在合理的結(jié)合模式，但沒有特異性，可能為多靶點(diǎn)酪氨酸激酶抑制劑。2.通過合成得到了10個(gè)目標(biāo)化合物即ZHT002～ZHT011，經(jīng)核磁共振氫譜和碳譜確認(rèn)結(jié)構(gòu)正確。3.藥理活性測定結(jié)果顯示：ZHT009和ZHT010對4種體外培養(yǎng)的人腫瘤細(xì)胞株都有較強(qiáng)的增殖抑制作用，IC50都在7.76μg/ml以下。其中ZHT010對人胃腺癌SGC-7901細(xì)胞的

5、增殖抑制作用最強(qiáng)，IC50為0.64μg/ml。ZHT009對人早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞、人胃腺癌SGC-7901細(xì)胞、人結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞和人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的IC50分別為3.44、7.16、4.86和7.76μg/ml；ZHT010對人早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞、人胃腺癌SGC-7901細(xì)胞、人結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞和人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的IC50分別為1.58、0.64、2.47和5.22μg/ml；ZHT0

6、01、ZHT005、ZHT007和ZHT011對人早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞有一定增殖抑制作用，IC50分別為27.01、58.55、16.59和21.36μg/ml；ZHT002、ZHT004和ZHT008對此細(xì)胞株生長沒有影響。除了ZHT009和ZHT010其它ZHT化合物對人胃腺癌SGC-7901細(xì)胞、人結(jié)腸癌SW-480細(xì)胞和人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的生長基本沒有影響。
　　 結(jié)論：1.基于酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)并合成的黃