miR-196a2 rs11614913單核苷酸多態(tài)性在胃癌遺傳易感性、預后以及化療敏感性中的作用探討.pdf

1、胃癌(gastric cancer，GC)是最常見的惡性消化系統(tǒng)腫瘤之一，在世界范圍內(nèi)，每年正以將近100萬新發(fā)病例的速度增長，在全球惡性腫瘤的發(fā)病率中位于第四位，據(jù)世界衛(wèi)生組織(WTO)統(tǒng)計，每年大約有70多萬人死于胃癌或者胃癌相關疾病，居常見腫瘤死因的第二位。根據(jù)地理位置劃分，胃癌主要發(fā)生于亞洲、非洲以及南美洲等發(fā)展中國家。以亞洲國家為例，中日韓三個國家，每年的新發(fā)胃癌病例數(shù)大約占全球胃癌總發(fā)病數(shù)的2/3多。其中，我國作為世界上人口

2、最多的國家，每年新發(fā)胃癌病例數(shù)大約占全球胃癌總數(shù)的1/2，是僅低于肺癌的第二大致死性惡性腫瘤。雖然近年來隨著手術(shù)方法的改進以及放化療等技術(shù)手段的應用，胃癌的死亡率有一定程度的下降，但是胃癌的五年生存率仍然偏低。大量的流行病學已經(jīng)證實，胃癌的發(fā)生是多因素、多階段、多基因共同作用的復雜疾病，越來越多的研究也表明，環(huán)境暴露因素、遺傳因素對胃癌的發(fā)生發(fā)展以及預后和化療敏感性都起到至關重要的作用。處于相同環(huán)境暴露的不同個體往往只有一小部分人罹患胃

3、癌，且患病后其預后及對化療的敏感性也有顯著的不同，這些結(jié)果都提示我們?nèi)巳簩ξ赴┛赡艽嬖趥€體易感性及預后的差異。
　　隨著人類基因組計劃的進行，大量的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)基因關鍵位置的遺傳變異將會對基因的結(jié)構(gòu)、表達以及分子調(diào)控功能產(chǎn)生重要的影響，進一步導致機體部分生物學調(diào)控功能的改變。單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)是最常見的基因遺傳變異。大量研究結(jié)果表明，基因遺傳變異（geneti

4、c variation）決定了個體罹患腫瘤的遺傳易感性，SNPs能夠通過改變基因結(jié)構(gòu)或表達量，從而影響基因?qū)C體的調(diào)控作用。藥物化療是胃癌抗腫瘤治療的重要手段，氟尿嘧啶類和鉑類藥物是胃癌化療的常規(guī)用藥，但相同藥物對不同患者往往產(chǎn)生不同的療效，這些現(xiàn)象提示不同個體對腫瘤化療藥物的療效也不盡相同，其中化療相關的基因多態(tài)性也許發(fā)揮重要作用。
　　MiRNAs(microRNAs，微小RNA)主要是指一類長度為18～23個核苷酸的進化上保

5、守的非編碼小RNA分子。它們可參與包括細胞增殖、細胞發(fā)育、分化、凋亡及腫瘤的發(fā)生發(fā)展，行使多種重要的生物學功能。許多研究已經(jīng)表明，單個或多個SNPs間的聯(lián)合效應與腫瘤發(fā)生發(fā)展及預后顯著相關，并且可能存在重要的基因-基因、環(huán)境-基因交互作用。但其確切的機制并未完全闡明。早在2008年，Hu等人發(fā)現(xiàn)位于miR-196a2上的rs11614913位點可以影響miRNA從pre-miRNA到成熟miRNA的過程，同時證實該位點與肺癌的發(fā)生發(fā)展密

6、切相關。但是miR-196a2上的rs11614913基因遺傳變異在胃癌中的研究甚少。近來的研究表明，異常表達的miRNAs與胃癌的發(fā)生發(fā)展都具有密切的聯(lián)系:當pri-miRNAs(primary miRNAs，初級miRNAs)上存在重要的功能學SNPs，可能會影響pre-miRNAs(precursor miRNAs，前體miRNAs)的生成過程，進而導致成熟miRNAs的結(jié)構(gòu)或者表達水平異常;成熟的miRNAs生成過程需要多個關鍵

7、調(diào)控基因的參與（如DICER、DROSHA等基因）。如我們所知，miRNAs發(fā)揮調(diào)控作用是通過與基因3'UTR(3'untranslate region，非翻譯區(qū))結(jié)合引起靶基因mRNA降解或抑制其翻譯，進而參與胃癌的發(fā)生發(fā)展。因此，當SNPs位于成熟miRNAs上，可直接影響miRNAs對靶基因的調(diào)控作用，進一步可能導致胃癌的發(fā)生，以及預后和對藥物敏感性的差異。
　　雖然已有研究發(fā)現(xiàn)miR-196a2 rs11614913與許多

8、腫瘤的易感性顯著關聯(lián)，但是其與胃癌的遺傳易感性還有待探討。本研究擬通過系統(tǒng)探討miR-196a2上的rs11614913位點遺傳變異在胃癌發(fā)病風險中的作用及其對胃癌患者預后的影響，并且探討其與胃癌患者化療敏感性的關系。為以后的臨床醫(yī)療實踐提供理論依據(jù)。
　　本文主要從以下幾個方面進行了論述：
　　第一部分 miR-196a2 rs11614913基因遺傳變異與胃癌發(fā)生發(fā)展的關聯(lián)性研究
　　近年來，隨著miRNAs逐漸為

9、人們所了解，其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用逐漸被揭示出來。本研究旨在通過分子流行病學病例-對照研究探討其可能的生物學關聯(lián)。MIR196a2 rs11614913(T＞C)的多態(tài)性已被報道與各種癌癥的發(fā)展和進展有關。在本項研究中，目的是探索MIR196a2 rs11614913多態(tài)性與胃癌中國人群的遺傳易感性的關聯(lián)。
　　本研究采用包括1689例胃癌病例與1946例健康對照的兩階段分子流行病學病例-對照研究方法分析候選SNPs與胃

10、癌發(fā)病風險之間的關聯(lián)性，其中一階段研究包括749例病例和900例對照，二階段研究中包括940例病例和1046例對照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)單核苷酸變異rs11614913 CC無論是發(fā)現(xiàn)隊列還是驗證隊列相對于CT/TT基因型都能顯著降低中國人群罹患胃癌的風險(發(fā)現(xiàn)隊列:調(diào)整的odds ratio(OR)=0.78，95％confidence interval(CI)=0.62-0.99;驗證隊列0.64，0.52-0.80）。
　　研究結(jié)果證明

11、miR-196a2 rs11614913與中國人群的胃癌發(fā)病風險顯著相關，其也許是一個重要的胃癌易感生物標志物，對于提高胃癌的早診早治具有重要的意義。
　　第二部分 miR-196a2rs11614913基因遺傳變異與胃癌預后及化療敏感性的關聯(lián)性研究
　　在本項研究的第一部分，發(fā)現(xiàn)miR-196a2 rs11614913遺傳多態(tài)性與胃癌的易感性顯著相關，但是其與胃癌患者的術(shù)后生存及化療敏感性是否存在著關聯(lián)還有待大樣本人群的進

12、一步驗證。
　　本部分研究采用回顧性的隊列研究設計，探討miR-196a2 rs11614913與胃癌預后及化療敏感性之間的關系。本研究回顧收集江蘇省宜興市人民醫(yī)院及宜興市腫瘤醫(yī)院就診和接受手術(shù)治療的新發(fā)胃癌患者，均經(jīng)組織病理學確診，無性別、年齡及病理類型的限制，共收集病例1022例。隨訪五年后，共有940例樣本可以納入研究，進行下一步的臨床研究。發(fā)現(xiàn)攜帶CC基因型的個體相比于CT/TT的患者有一個更好的預后(HR=0.72，95

13、％ CI=0.55-0.95)，并且相對于賁門癌患者，攜帶CC基因型的非賁門癌個體有更好的預后(非賁門癌:HR=0.57，95％ CI=0.40-0.83;賁門癌:HR=1.00，95％ CI=0.65-1.53)。但是，沒有發(fā)現(xiàn)miR-196a2 rs11614913與胃癌化療敏感性之間的關系。
　　本項研究提示miR-196a2 rs11614913也許是一個預測胃癌患者預后的敏感指標，但是其與胃癌化療敏感性之間的關系有待大樣