磷酸酶MTMR14的缺失促進小鼠胚胎成纖維細胞的自噬和增殖.pdf

1、MTMR14是一種新型的磷酸肌醇類磷酸酶。我們已經(jīng)報道過，該基因在小鼠骨骼肌細胞中的缺失可以引起骨骼肌細胞內(nèi)鈣離子濃度的失衡從而導(dǎo)致小鼠骨骼肌肌肉疲勞和肌無力。為了進一步研究其生理功能，我們建立了MTMR14 WT（野生型）和KO（敲除型）胚胎成纖維細胞（MEFs），采用免疫熒光技術(shù)檢測了MTMR14在MEFs中的表達和定位，發(fā)現(xiàn)該基因在MEFs中是全細胞分布的，在細胞核中表達豐度較高，細胞質(zhì)中相對弱些，并且與線粒體有一定的共定位。采用

2、MTT方法比較了兩組細胞的增殖，發(fā)現(xiàn)與WT相比，MTMR14 KO MEFs增殖更快。而有趣的是MTMR14 KO MEFs存在明顯的細胞自噬現(xiàn)象。細胞周期分析發(fā)現(xiàn)，在非同步化情況下，兩組細胞中處于分裂期（M期）的細胞比例相當；但是Real-time PCR顯示在KO細胞中，細胞周期關(guān)鍵性調(diào)控因子P21和P27的水平降低，而CyclinD和CyclinE的水平明顯升高。我們進一步對增殖相關(guān)的信號通路進行檢測，發(fā)現(xiàn)在IGF（胰島素樣生長因