福氏志賀菌對喹諾酮類耐藥與gyrA、parC基因突變關(guān)系的研究.pdf

1、目的： 1．了解廣州地區(qū)部分福氏志賀菌對臨床常用14種抗生素的耐藥情況，為臨床合理有效治療菌痢提供實(shí)驗(yàn)論依據(jù)。 2．研究福氏志賀菌對喹諾酮類耐藥與gyrA、parC基因突變的關(guān)系。 3．研究藥物環(huán)境壓力的變化與福氏志賀菌耐藥產(chǎn)生的關(guān)系。 方法： 1．46株福氏志賀菌對14種臨床常用抗生素的藥物敏感性試驗(yàn)用K-B法進(jìn)行檢測，同時(shí)用瓊脂稀釋法檢測其對諾氟沙星(NOR)、環(huán)丙沙星(CIP)及氧氟沙星(O

2、FL)的最小抑菌濃度(MIC)，具體要求參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所2005標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。 2．細(xì)菌DNA提?。翰捎弥蠓蟹?。 3．參照大腸埃希菌基因序列設(shè)計(jì)兩對引物，分別用聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增福氏志賀菌及對照株(福氏志賀菌野生株2a301)的gyrA(295bp)、parC(387bp)基因，對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(SSCP)及測序分析。 4．利用不同濃度NOR對福氏志賀菌(NOR敏感)進(jìn)行體外耐藥性誘導(dǎo)，再

3、用瓊脂稀釋法檢測誘導(dǎo)后的耐藥株對NOR的最小抑菌濃度(MIC)，然后對其擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序分析。 結(jié)論： 1．福氏志賀菌對臨床常用的14種抗生素表現(xiàn)多重耐藥，三代頭孢菌素及IMP、TZP、ATM對其表現(xiàn)良好的體外抗菌活性。 2．gyrA基因突變是導(dǎo)致福氏志賀菌對喹諾酮耐藥的主要原因，而ParC基因的突變可增加細(xì)菌對喹諾酮的耐藥性。 3．藥物選擇性壓力與細(xì)菌耐藥形成有直接的關(guān)系，即藥物選擇性壓力導(dǎo)致細(xì)菌基因突