乳酸菌對氟喹諾酮類藥物耐藥機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以源于內(nèi)蒙古地區(qū)的羊乳及其制品、嬰兒及乳牛糞便中分離的10株乳酸菌為研究對象，以標準敏感菌為對照，首先用試管兩倍稀釋法測定試驗菌株對四種氟喹諾酮類藥物(氧氟沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星)的最小抑菌濃度(MIC)，并以MIC值為參考值用杯碟法通過抑菌直徑的判斷篩選出耐藥菌株。 對耐藥菌株通過乳酸菌的16SrRNA引物進行PCR擴增并對PCR產(chǎn)物測序以進行鑒定。然后通過熒光分光光度法結(jié)合外排蛋白抑制劑對試驗菌株的一種耐藥

2、機制-主動外排系統(tǒng)做一證實。另一種可能存在的耐藥機制拓撲異構(gòu)酶Ⅱ(DNA旋轉(zhuǎn)酶)中g(shù)yrA基因和拓撲異構(gòu)酶Ⅳ中parC基因的氟喹諾酮類藥物耐藥決定區(qū)(QRDR)的點突變，分別用相應的引物對12株耐氟喹諾酮類藥的乳酸菌的QRDR區(qū)進行PCR擴增，并選擇其中2株菌進行QRDR基因序列測定來確定。 試驗菌株對氟喹諾酮類藥物均耐藥，并且其耐藥機制一部分是由于乳酸菌主動外排系統(tǒng)的作用引起的，但是外排系統(tǒng)只是乳酸菌耐藥的一個原因，試驗菌株還

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