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文檔簡介
1、目的:拉米夫定是抗病毒核苷類藥物,對乙型肝炎病毒(HBV)有明顯的抑制作用,但拉米夫定易復(fù)發(fā)和血清轉(zhuǎn)換率低。因此拉米夫定治療乙型肝炎的最大問題是長期治療后產(chǎn)生病毒變異而耐藥和停藥后HBV DNA的反跳。本研究探討拉米夫定治療后乙型肝炎病毒耐藥位點出現(xiàn)的變化規(guī)律,分析其發(fā)生機(jī)制,對進(jìn)一步治療方案的確定、分析YMDD變異對治療效果的影響具有重要臨床價值。
方法:選擇應(yīng)用拉米夫定治療的患者14例,常規(guī)離心后收集外周血清,定量PCR擴(kuò)
2、增,純化后通過雙脫氧測序的方法獲得HBV DNA序列,最后通過計算機(jī)Mclone軟件進(jìn)行分析,動態(tài)觀測不同耐藥時段HBV DNA變異位點發(fā)生規(guī)律。
結(jié)果:應(yīng)用拉米夫定的患者隨著使用時間的延長,HBV DNA水平逐漸轉(zhuǎn)陽,經(jīng)過測序發(fā)現(xiàn)大部分的患者都出現(xiàn)YMDD變異,其中有11例為YVDD變異,而3例出現(xiàn)YIDD變異。隨著用藥時間的進(jìn)一步延長,部分患者出現(xiàn)ALT反彈,進(jìn)行第2次測序中發(fā)現(xiàn),在原有YMDD變異基礎(chǔ)之上,又出現(xiàn)許多新的
3、變異位點,主要發(fā)生位點有:A181V T184S,A181T S202I,A181T S202I,A181T V214,T184S V214A,A181V T184S,T184S S202I,A181V Q215S,A181V T184S,V214A,A181T,A181S V214A,S202T S239C C304S等變異株的發(fā)生,變異位點集中于181位點與214位點之間。
結(jié)論:拉米夫定耐藥株以YMDD基序(214位點)
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