拉米夫定抗乙型肝炎病毒感染中耐藥相關(guān)基因變異位點(diǎn)的動(dòng)態(tài)分析.pdf

1、目的:拉米夫定是抗病毒核苷類(lèi)藥物,對(duì)乙型肝炎病毒(HBV)有明顯的抑制作用,但拉米夫定易復(fù)發(fā)和血清轉(zhuǎn)換率低。因此拉米夫定治療乙型肝炎的最大問(wèn)題是長(zhǎng)期治療后產(chǎn)生病毒變異而耐藥和停藥后HBV DNA的反跳。本研究探討拉米夫定治療后乙型肝炎病毒耐藥位點(diǎn)出現(xiàn)的變化規(guī)律,分析其發(fā)生機(jī)制,對(duì)進(jìn)一步治療方案的確定、分析YMDD變異對(duì)治療效果的影響具有重要臨床價(jià)值。
　　方法:選擇應(yīng)用拉米夫定治療的患者14例,常規(guī)離心后收集外周血清,定量PCR擴(kuò)

2、增,純化后通過(guò)雙脫氧測(cè)序的方法獲得HBV DNA序列,最后通過(guò)計(jì)算機(jī)Mclone軟件進(jìn)行分析,動(dòng)態(tài)觀測(cè)不同耐藥時(shí)段HBV DNA變異位點(diǎn)發(fā)生規(guī)律。
　　結(jié)果:應(yīng)用拉米夫定的患者隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng),HBV DNA水平逐漸轉(zhuǎn)陽(yáng),經(jīng)過(guò)測(cè)序發(fā)現(xiàn)大部分的患者都出現(xiàn)YMDD變異,其中有11例為YVDD變異,而3例出現(xiàn)YIDD變異。隨著用藥時(shí)間的進(jìn)一步延長(zhǎng),部分患者出現(xiàn)ALT反彈,進(jìn)行第2次測(cè)序中發(fā)現(xiàn),在原有YMDD變異基礎(chǔ)之上,又出現(xiàn)許多新的

3、變異位點(diǎn),主要發(fā)生位點(diǎn)有:A181V T184S,A181T S202I,A181T S202I,A181T V214,T184S V214A,A181V T184S,T184S S202I,A181V Q215S,A181V T184S,V214A,A181T,A181S V214A,S202T S239C C304S等變異株的發(fā)生,變異位點(diǎn)集中于181位點(diǎn)與214位點(diǎn)之間。
　　結(jié)論:拉米夫定耐藥株以YMDD基序(214位點(diǎn))