“慢性腎衰基本方”抗腎小管-間質(zhì)纖維化的體外研究.pdf

1、腎小管間質(zhì)纖維化(tubulointerstitialfibrosis，TIF)是所有慢性腎臟疾病(chronickidneydiseases，CKD)向終末期腎病(endstagerenaldiseases，ESRD)進(jìn)展的最終共同途徑之一。目前在抗腎纖維化藥物治療方面尚無令人滿意的西藥，本學(xué)科經(jīng)驗(yàn)方“慢性腎衰基本方”在十多年的臨床應(yīng)用中證實(shí)有延緩腎衰竭進(jìn)展的作用。 本研究通過觀察“慢性腎衰基本方”對(duì)轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-

2、β1)誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響，以進(jìn)一步證實(shí)并初步探討其延緩慢性腎衰TIF的作用機(jī)制。 [方法]予清潔級(jí)新西蘭大白兔以中藥煎劑灌胃3天后制備“慢性腎衰基本方”含藥兔血清。體外培養(yǎng)人類近端腎小管上皮細(xì)胞株(HK-2細(xì)胞)，應(yīng)用不同濃度含藥血清處理經(jīng)TGF-β1誘導(dǎo)活化的HK-2細(xì)胞，然后應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法、流式細(xì)胞技術(shù)測定HK-2細(xì)胞α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的表達(dá)率；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附檢測法(ELI

3、SA)測定培養(yǎng)上清纖維結(jié)蛋白(FN)及Ⅳ型膠原(Col-Ⅳ)水平，并進(jìn)而計(jì)算單個(gè)細(xì)胞FN及Col-Ⅳ分泌水平。 [結(jié)果] 1.TGF-β1誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞α-SMA的表達(dá)。 2.TGF-β1誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)FN和Col-Ⅳ的分泌。 3.含藥兔血清呈劑量依賴方式逆轉(zhuǎn)TGF-β1誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞α-SMA的表達(dá)。 4.含藥兔血清呈劑量依賴方式逆轉(zhuǎn)TGF-β1誘導(dǎo)的HK-2單個(gè)細(xì)胞FN及Co