胎盤提前老化的臨床意義及發(fā)病機制的研究.pdf

1、雖然迄今為止尚無準確的胎盤老化的定義，但一般認為，胎盤自妊娠37周以后開始有老化改變并逐漸加重，胎盤老化改變主要表現(xiàn)為胎盤生長減慢甚至停止，胎盤表面、絨毛板和絨毛間隙出現(xiàn)纖維蛋白沉著和鈣化灶，絨毛上皮和血管基底膜增厚，常伴有胎盤功能減退。胎盤提前老化(Prematureagingofplacenta)是指妊娠足月前胎盤提前出現(xiàn)上述退行性的結(jié)構(gòu)改變。臨床上主要是通過超聲檢查在37周之前發(fā)現(xiàn)Ⅲ級胎盤成熟度而診斷。臨床觀察發(fā)現(xiàn)，在37周前，尤

2、其是在34周以前出現(xiàn)Ⅲ級胎盤成熟度的孕婦，圍生期并發(fā)癥如先兆子癇、胎兒生長受限、羊水過少、胎兒窘迫的發(fā)生率顯著增加。故有人提出胎盤提前老化的超聲征象是妊娠結(jié)局不良的一個敏感預(yù)測指標。但是胎盤提前老化的超聲征象的病理基礎(chǔ)及發(fā)病機制尚不清楚，從多個方面研究胎盤提前老化的超聲征像與胎盤功能及胎盤病理改變的關(guān)系，探討胎盤提前老化的發(fā)生機制，對該現(xiàn)象的觀察和處理，及妊高癥、FGR等妊娠并發(fā)癥的防治具有十分重要的意義。 超聲觀察到的強光點和

3、強光團與胎盤內(nèi)的鈣化和纖維化相對應(yīng)。研究表明，妊娠各期胎盤組織中都有細胞凋亡現(xiàn)象，隨孕周進展，胎盤組織中凋亡細胞逐漸增加，而過期妊娠、先兆子癇、FGR等妊娠并發(fā)癥中又進一步增加。胎盤的細胞凋亡常與胎盤鈣化及纖維化有關(guān)，細胞凋亡先于鈣化，凋亡小體可以成為鈣化的核心。另一方面，伴有胎盤功能下降的妊娠并發(fā)癥如FGR、先兆子癇等均與母體血液循環(huán)中前列腺素水平失衡有關(guān)，在這些疾病的臨床癥狀出現(xiàn)前2月就可在母體中就可檢測到前列環(huán)素/血栓素的比例下降

4、，主要表現(xiàn)為前列環(huán)素合成減少。最近的研究顯示，前列腺素不僅能調(diào)節(jié)血管的反應(yīng)性，而且能調(diào)節(jié)多種細胞的增殖、分化和凋亡，前列腺素中的血栓素可促進體外培養(yǎng)滋養(yǎng)細胞的凋亡，抑制其分化，但前列環(huán)素對滋養(yǎng)細胞的影響尚不清楚。為了解胎盤提前老化的超聲征象的病理生理基礎(chǔ)，及細胞凋亡、前列環(huán)素在胎盤提前老化發(fā)病機制中的作用。我們進行了此研究。 資料和方法1.系統(tǒng)性分析南方醫(yī)院2000年1月-2005年5月54例經(jīng)超聲診斷為胎盤提前老化孕婦的臨床資

5、料，并隨機抽取同期248例非胎盤提前老化孕婦的資料作為對照，比較兩組的分娩孕齡及小于胎齡兒、羊水過少、胎糞污染、先兆子癇等并發(fā)癥發(fā)生情況；控制分娩孕齡及分娩方式，按2：1比例隨機選擇同期正常孕婦作為對照，比較兩組的新生兒出生體重和Apgar評分；控制檢查孕周，按1：1比例選擇同期正常孕婦作為對照，比較兩組的多普勒臍血流參數(shù)和母體血清E3濃度。 2.前瞻性地選擇2003年9月-2004年12月在南方醫(yī)院及廣州市第二人民醫(yī)院進行產(chǎn)前

6、檢查和住院分娩的經(jīng)超聲診斷為胎盤提前老化的孕婦15例作為研究對象，隨機選擇同期分娩孕齡與其相匹配的15例正常孕婦作為對照，分娩后留胎盤行HE染色觀察胎盤的病理改變，采用計算機圖象分析儀測量胎盤終末絨毛毛細血管、絨毛間腔及絨毛的面積及視野總面積，利用SPSS軟件計算出這些參數(shù)的體積密度。 3.采用免疫組化的方法檢測胎盤HPL的表達及分布情況，并采用計算機圖文分析軟件對結(jié)果進行半定量分析。 4.采用TUNEL染色法檢測胎盤細

7、胞凋亡情況，記數(shù)凋亡指數(shù)(AI)。 5.取正常孕產(chǎn)婦胎盤組織，采用絨毛組織預(yù)消化法進行原代胎盤滋養(yǎng)細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)6天后滋養(yǎng)細胞爬滿瓶底，予進行滋養(yǎng)細胞鑒定后，分別以不同濃度的PGI2刺激培養(yǎng)。用放射免疫的方法測量24、48小時培養(yǎng)液中HPL的濃度；刺激培養(yǎng)48小時后收集細胞，用臺盼蘭染色判斷細胞活力，用流式細胞儀和TUNEL染色法檢測細胞凋亡。記錄各項檢測指標的數(shù)據(jù)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，比較不同濃度前列環(huán)素對滋養(yǎng)細胞凋亡和分泌功能的影

8、響。 結(jié)果1.胎盤提前老化組的發(fā)病率約為1.28％，其妊娠并發(fā)癥的發(fā)生率為44.44％，對照組為22.17％，兩者比較，差異具有顯著性(P＜0.001)，其中羊水過少(25.92％)、子癇前期(12.96％，)、和小于胎齡兒(16.67)的發(fā)生率顯著高于對照組(8.87％，1.61％％和4.84％，P＜0.05)；兩組的分娩孕齡分別為(37.26±2.08)周和(39.27±2.11)周，胎盤提前老化組的孕齡顯著高于對照組；胎盤

9、提前老化組的新生兒出生體重顯著低于配對對照組[(2769.81±561.30)gvs(2941.96±460)g，P＜0.05]，說明胎盤提前老化的超聲征象與羊水過少、子癇前期、低體重胎兒等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生有關(guān)。 2胎盤提前老化組的臍動脈血流的搏動指數(shù)(PI)及臍動脈收縮期最大血流速度(S)與舒張期血流速度(D)的比值(S/D)顯著高于配對對照組[(0.79±0.15)vs(0.71±0.09)P＜0.05]和[(2.33±0

10、.38)vs(2.00±0.17)，P＜0.001]，說明胎盤提前老化的形態(tài)學(xué)改變已對臍血流造成影響。 3.病理學(xué)檢查提示提前老化的胎盤發(fā)生了絨毛間隙纖維素沉著和鈣化、基底膜增厚和鈣化、絨毛間質(zhì)纖維增生、絨毛纖維素樣壞死、絨毛合體結(jié)節(jié)增生、細胞滋養(yǎng)細胞增生等病理改變；病理定量學(xué)分析顯示胎盤提前老化組胎盤絨毛纖維素樣壞死病灶數(shù)及含合體結(jié)節(jié)的絨毛的比例顯著高于對照組[(35.33±15.19)個vs(23.76±11.92)個，P＜

11、0.05和[0.34(0.24，0.56)VS0.2519，0.30]，P＜0.05]]；胎盤的功能組織計量顯示絨毛血管的體積密度顯著小于對照組[(23.57±1.14)vs(25.78±1.55)，P＜0.01]]，絨毛間隙的體積密度顯著小于對照組[(38.98±6.39)vs(55.41±6.95)，P＜0.001]，兩組的絨毛體積密度無顯著差異[(49.31±13.56)vs(50.84±14.56)，P＞0.05)，提示胎盤提前

12、老化組胎盤功能組織結(jié)構(gòu)受到損害，有效功能組織結(jié)構(gòu)減少，使胎盤的氣體交換及物質(zhì)運輸、合成能力降低，造成圍生期發(fā)病率顯著增加。 3.胎盤提前老化組的孕婦的母血E3濃度與正常對照組相比無顯著性差異[7.95(4.7，12.25)ng/mlvs8.7(5.45，11.65)ng/m1，P＞0.05]；胎盤提前老化組的孕婦胎盤內(nèi)HPL的免疫組化顯色反應(yīng)半定量值與正常對照組相比無顯著性差異[20.87(15.44，24.92)vs19.61

13、(18.32，20.67)，P＞0.05]，說明胎盤提前老化的形態(tài)學(xué)改變尚未影響胎盤的E3和HPL分泌。 4.胎盤的原位細胞凋亡檢測(TUNEL法)提示提前老化胎盤細胞凋亡指數(shù)顯著高于對照組[0.42(0.29，0.74)vs0.23(0.12，0.27)，P＜0.001]，提示細胞凋亡增加可能是胎盤提前老化的發(fā)病機制之一。 5.1uM、3uM和10uM.濃度的PGI2分別刺激培養(yǎng)原代第6天的正常足月滋養(yǎng)細胞，與空白對照

14、組相比，培養(yǎng)48小時后研究組滋養(yǎng)細胞融合增加，細胞活力顯著高于對照組[(0.65±0.022)、(0.70±0.20)、(0.73±0.021)VS(0.63±0.020)，P＜0.05]；與空白對照組相比，在3uMl/L和10uM/LPGI2中培養(yǎng)48小時后滋養(yǎng)細胞凋亡指數(shù)顯著降低[(30.63±1.05)、(26.84±1.66)vs(32.90±1.73)，P＜0.001]；在1uM/LPGI2中培養(yǎng)48小時后，滋養(yǎng)細胞凋亡指數(shù)與

15、對照組比較，差異無顯著性[(31.98±1.20)vs(32.90±1.73)，P＞0.05]。24小時和48小時HPL分泌量顯著高于對照組[(0.52±0.10)(0.57±0.06)(0.71±0.03)vs(0.28±0.06),P＜0.001]和[(0.33±0.07*)(0.42±0.11＃)(0.52±0.08)VS(0.21±0.04)。說明PGI2能在形態(tài)和功能上顯著促進體外培養(yǎng)足月滋養(yǎng)細胞的分化，抑制其凋亡，對滋養(yǎng)細胞

16、有保護作用。 結(jié)論1.胎盤提前老化的超聲征象與不良妊娠結(jié)局相關(guān)，應(yīng)在妊娠晚期加強監(jiān)護 2.提前老化胎盤功能組織結(jié)構(gòu)受損，有效功能組織結(jié)構(gòu)減少，導(dǎo)致臍血流減少，是造成其圍生期發(fā)病率顯著增加的病理基礎(chǔ)。 3.提前老化胎盤分泌E3和HPL的功能無明顯改變，說明提前老化胎盤仍有很強的代償能力。 5.胎盤內(nèi)細胞凋亡增加是胎盤提前老化的發(fā)病機制之一。PGI2能抑制體外培養(yǎng)滋養(yǎng)細胞的凋亡，在形態(tài)和功能上促進其分化，對滋