血清和膽汁中MMP7的表達(dá)水平對膽管癌診斷價(jià)值.pdf

1、目的：
　　 一、檢測患者血清中MMP-7表達(dá)水平，探討其對膽管癌的臨床診斷與鑒別診斷中的價(jià)值。
　　 二、檢測患者膽汁中MMP-7表達(dá)水平，探討其對膽管癌的臨床診斷與鑒別診斷中的價(jià)值。
　　 材料和方法：
　　 一、材料
　　 收集2011年12月至2012年6月在東方肝膽外科醫(yī)院內(nèi)鏡科行ERCP診療的梗阻性黃疸患者(n=49)的血清和膽汁。膽管癌的診斷依據(jù)組織活檢、細(xì)胞刷檢、影像學(xué)診斷和臨床隨

2、訪。共收集到29位膽管癌患者和20位良性狹窄患者。
　　 二、 MMP-7及臨床參數(shù)的檢測
　　 （一）抽取患者空腹靜脈血3ml，室溫下靜置3-4h，3000r/min離心10min，留取上清后于-80℃冰箱保存待測。
　　 （二）在注射造影劑之前收集膽汁且所有膽汁都源于梗阻或狹窄段以上，3000r/min離心10min，留取上清后于-80℃冰箱保存待測。
　　 （三）采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法(ELISA)

3、檢測血清和膽汁中MMP-7表達(dá)水平。取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置30分鐘。取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入100μ L的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。空白微孔中加入100μ L的樣品，空白對照加入100μ L的蒸餾水。在各孔中加入50μ L的酶標(biāo)記溶液（不含空白對照孔）。將酶標(biāo)板用封口膠封閉后，37℃孵育反應(yīng)1小時(shí)。充分清洗酶標(biāo)板5次，保持各孔有充足的水壓。酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙徹底拍干。各孔加入顯色劑A50μL，各孔加入顯色劑B

4、50μL。20-25℃下避光反應(yīng)10分鐘。各孔加入50μ L終止液，終止反應(yīng)。
　　 （四）血清中其他生化檢查包括總膽紅素(TB)、直接膽紅素(DB)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、CA19-9、CEA在東方肝膽外科醫(yī)院檢驗(yàn)科用常規(guī)方法檢測。
　　 三、統(tǒng)計(jì)分析
　　 采用SSPS20.0進(jìn)行分析，計(jì)量資料兩獨(dú)立樣本間的比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，計(jì)

5、數(shù)資料樣本間比較采用Pearson Chi-square檢驗(yàn)。相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)檢驗(yàn)，繪制受試者工作特征曲線（ROC曲線），檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 一、血清MMP-7表達(dá)膽管癌組(M5.47ng/ml，IQR4.26-6.81;x±SD5.42±0.30 ng/ml)高于良性組(M4.22ng/ml，IQR3.82-4.82;x±SD4.28±0.19ng/ml)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=

6、0.009)。以為4.88 ng/ml(AUC0.722，95％CI0.580-0.865)為界值血清MMP-7診斷膽管癌的敏感性為65.5％、特異性為80.0％。
　　 二、膽汁MMP7表達(dá)膽管癌組(M9.01ng/ml，IQR8.24-10.78;x±SD10.05±0.69 ng/ml)高于良性組(M7.64ng/ml，IQR7.02-8.70;x±SD8.26±0.443ng/ml)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.012);