組織工程化肌腱體外動態(tài)構建初步研究.pdf

1、目的：以生物衍生肌腱為支架，新生小雞屈趾肌腱的肌腱細胞為種子細胞，在動態(tài)三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中，初步探索合適的周期性牽張應力加載參數以及其作用效果，為體外動態(tài)構建組織工程化肌腱提供實驗依據。 方法：①用Handerson分步酶消化法分離新生小雞屈趾肌腱的肌腱細胞，用2～4代的細胞作為種子細胞。②用INSTRON8874生物力學測試系統(tǒng)(InstronCO.，USA)作生物衍生肌腱支架的單軸拉伸實驗，測定生物衍生肌腱支架的力學特性并與正

2、常人體肌腱的力學特性作比較。檢驗生物衍生肌腱支架是否適合作為體外三維動態(tài)構建組織工程肌腱的細胞支架。③將肌腱細胞與生物衍生肌腱支架復合物作靜態(tài)培養(yǎng)，作掃描電鏡觀察細胞在支架表面的生長情況，以檢測生物衍生肌腱支架的細胞相容性。④將肌腱細胞與生物衍生肌腱支架復合物置于動態(tài)細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中，在不同參數的周期性牽張應力的作用下進行體外三維動態(tài)培養(yǎng)。用細胞計數檢測細胞增殖，用高效液相色譜(HPLC)檢測羥脯氨酸含量，用掃描電鏡觀察細胞形態(tài)，評價不同

3、參數的周期性牽張應力對肌腱細胞增殖、功能、及排列的影響。⑤將肌腱細胞與生物衍生肌腱支架復合物分別作靜態(tài)培養(yǎng)及動態(tài)培養(yǎng)96小時后行石蠟切片、HE染色，觀察細胞在生物衍生肌腱支架內部的生長情況。 結論：①生物衍生肌腱支架由于具備優(yōu)良的力學性能以及細胞相容性，是體外構建組織工程肌腱的良好細胞支架；生物衍生肌腱支架還是研究三維培養(yǎng)條件下周期性牽張應力對肌腱細胞作用的良好載體。②特定參數三維培養(yǎng)條件下，周期性牽張應力有效地促進了肌腱細胞的增