5種局麻藥聯(lián)合分析及丁卡因死后分布研究.pdf

1、目的：研究建立生物檢材中5種常見局麻藥靈敏度高、操作簡便的分析方法；分析大鼠以兩種不同給藥方式急性中毒后體內(nèi)丁卡因的分布規(guī)律。具體內(nèi)容包括：⑴建立生物檢材中5種常見局麻藥的聯(lián)合分析方法。⑵建立丁卡因靜脈注射中毒致死和舌下粘膜給藥中毒的動物模型，觀察大鼠中毒表現(xiàn)，對丁卡因以兩種不同方式在體內(nèi)的分布進(jìn)行檢測，獲得分布排序和重要毒理學(xué)數(shù)據(jù)。⑶研究丁卡因以兩種方式中毒致死在體內(nèi)各臟器、體液中的分布特點以及規(guī)律，為丁卡因中毒或死亡案件的檢材采集、

2、檢測、結(jié)果分析、死因判定等法醫(yī)學(xué)鑒定提供參考以及科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：①5種局麻藥的定性分析。氣相色譜分析方法的建立：分析樣品中準(zhǔn)確添加5種局麻藥，在一定pH條件下用乙醚萃取，氣相色譜檢測，根據(jù)局麻藥的保留時間（tr值）定性。②丁卡因的定量分析。配制丁卡因和內(nèi)標(biāo)物利多卡因的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列，用氣相色譜法進(jìn)行檢測：以丁卡因的濃度為橫坐標(biāo)（X），丁卡因與利多卡因的峰面積之比為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=a+bX，以此對

3、檢材中的丁卡因濃度進(jìn)行定量分析。③丁卡因體內(nèi)分布分布研究。SD 雌性大鼠24 只，隨機(jī)分為實驗一組、實驗二組、對照一組和對照二組，各組均為6 只。實驗一組大鼠按4倍LD50（LD50 為10.39mg/kg）的劑量尾部靜脈注射丁卡因溶液，實驗二組大鼠按4倍LD50的劑量通過舌下粘膜給藥，對照一組大鼠用等量生理鹽水尾部靜脈注射，對照二組大鼠用等量葡萄糖通過舌下粘膜給藥。實驗一組大鼠靜脈注射后30min內(nèi)發(fā)生抽搐后死亡，實驗二組大鼠1min

4、之內(nèi)發(fā)生抽搐,30min后恢復(fù)正常。實驗一組大鼠立即進(jìn)行解剖，實驗二組大鼠30min后空氣栓塞處死，取血液、心、肝、肺、腦、腎、脾、胃，檢測其中丁卡因的含量。對照組的大鼠所對應(yīng)的樣品為空白對照，經(jīng)統(tǒng)計處理對所得的各數(shù)據(jù)排序，獲得分布規(guī)律。
　　 結(jié)果：⑴5種局麻藥在氣相色譜中出峰先后順序依次為：利多卡因、普魯卡因、羅哌卡因、丁卡因、布比卡因。其中丁卡因在血液和肝臟中定量分析的線性范圍分別是5.0～500.0μg/mL、5.0～5

5、00.0μg/g，最低檢出限為血液0.5μg/mL、肝臟0.5μg/g（S/N≥3）。不同濃度的血液回收率為101.7±4.1％、99.6±5.4％、101.3±2.0％；日內(nèi)、日間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別小于5.2％、2.7％。⑵實驗一組大鼠在尾部靜脈注射丁卡因后1～5min 即開始抽搐、呼吸抑制,30min 內(nèi)全部死亡。實驗二組大鼠舌下粘膜給藥后出現(xiàn)興奮不安、呼吸頻率加快,20min后恢復(fù)正常。⑶丁卡因在靜脈注射實驗組大鼠臟器和體液中的濃度

6、大小分別依次是：心血＞肝＞胃＞肺≈脾＞心＞腦≈腎。丁卡因在舌下粘膜給藥實驗組大鼠臟器和體液中的濃度大小分別依次是：脾＞腎＞肺＞肝＞心＞心血＞腦＞胃。
　　 結(jié)論：①本實驗所建立的氣相色譜分析法可以同時測定5種常見局麻類藥物，該方法快速便捷，高效準(zhǔn)確，適用于醫(yī)源性中毒檢測和法醫(yī)毒物分析。②由丁卡因靜脈注射致死和粘膜給藥中毒的動物模型結(jié)果顯示：經(jīng)靜脈注射丁卡因死亡的大鼠肝臟和血液中的濃度最高，是疑為注射丁卡因中毒的案件最好的分析檢材