輔助T細胞及相關因子在隱球菌性腦膜炎患者中抗隱球菌效應的研究.pdf

1、隱球菌性腦膜炎（簡稱隱腦）是由隱球菌引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，該病預后嚴重，死亡率高。能致人類發(fā)病的隱球菌主要有新生隱球菌和格特隱球菌，其中新生隱球菌感染多發(fā)生于免疫力低下的人群，突出的表現(xiàn)在艾滋病人人群中，在HIV（+）人群中，每年平均有近百萬的隱球菌感染病例。隨著實體器官移植術的迅猛發(fā)展以及免疫抑制劑的大量使用，隱腦的發(fā)病率也越來越高。這都說明人體的免疫系統(tǒng)調節(jié)能力在隱腦的發(fā)病中起著至關重要的作用。
　　宿主在隱球菌入侵后

2、產(chǎn)生的免疫反應包括天然免疫和適應性免疫，天然免疫主要依賴于補體系統(tǒng)和吞噬效應因子（包括樹突狀細胞、巨噬細胞和嗜中性粒細胞），適應性免疫包括體液免疫和細胞免疫。不論是補體途徑還是吞噬效應都受到機體適應性免疫的調節(jié)。而輔助T細胞（Th細胞）是具有調節(jié)機體體液免疫和細胞免疫功能的細胞，當Th細胞被激活時，可以分泌細胞因子對機體免疫發(fā)揮調節(jié)作用。
　　鑒于Th1細胞及其相關細胞因子的保護作用以及Th2細胞及其相關細胞因子的非保護性作用在多

3、個實驗中已證實，但目前研究發(fā)現(xiàn)，除傳統(tǒng)的Th1和Th2細胞外，Th細胞還分為Th9、Th17和Th22細胞，其中Th22細胞主要與皮膚的病理生理及穩(wěn)態(tài)相關。所以本研究擬在前期實驗基礎上通過比較初發(fā)隱腦患者在治療前和治療后與正常對照病例外周血中Th9、Th17及其相關細胞因子的表達，初步探討人體感染隱球菌后的抗菌效應，尋找可能的治療靶點。
　　本研究通過流式細胞儀檢測技術檢測了12例隱腦患者治療前后及12例正常對照病例外周血中CD4

4、+T細胞中Th9和Th17細胞所占比例，通過兩兩比較，發(fā)現(xiàn)Th17細胞在未接受治療的隱腦患者中所占比例較正常對照明顯降低，P＜0.05，Th9細胞在未接受治療的隱腦患者中所占的比例與正常對照相比無統(tǒng)計學差異；經(jīng)治療后隱腦患者外周血中Th17細胞所占比例明顯上調，與治療前相比有顯著性差異，剔除治療無好轉病例后Th17細胞所占比例與正常對照相比也有顯著性增高，Th9細胞所占比例也明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義。同時，本實驗還采取實時定量PCR方

5、法比較了上述病例外周血CD4+T細胞中IL-4、IL-6、IL-9、IL-17、IFN-γ和TGF-β等Th細胞相關細胞因子的mRNA表達水平，發(fā)現(xiàn)IL-9和IL-17作為Th9和Th17細胞的主要分泌細胞因子，呈現(xiàn)出與Th9和Th17細胞類似的結果，而TGF-β作為Th17和Th9細胞的誘導分化細胞因子，也表現(xiàn)出同樣的表達趨勢，且TGF-β的表達水平同IL-9、IL-17都呈明顯正相關，P＜0.05，IL-6在隱腦患者治療后外周血CD

6、4+T細胞中的表達也較正常對照及治療前明顯升高，且與IL-17的表達呈正相關。最后，本實驗還建立了小鼠吸入隱球菌感染模型，通過觀察感染后不同時期小鼠肺組織病理變化與小鼠肺泡巨噬細胞上相關細胞因子的表達，發(fā)現(xiàn)隨著小鼠感染病情的加重，巨噬細胞中TNF-β的表達水平明顯升高。
　　我們的研究認為TGF-β誘導分化的Th17細胞及其相關細胞因子在隱腦患者抵御隱球菌感染中起重要作用，提示隱腦患者中Th17細胞的缺乏或不應答是導致隱球菌擴散至