胎兔皮膚無(wú)瘢痕愈合相關(guān)基因的克隆及篩選.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)就無(wú)瘢痕愈合過(guò)程中基因表達(dá)差異方面作以下研究,試圖從此入手深入了解無(wú)瘢痕愈合的分子機(jī)制.該實(shí)驗(yàn)試圖由動(dòng)物模型入手,針對(duì)實(shí)驗(yàn)的要求合理地應(yīng)用并改進(jìn)已有的實(shí)驗(yàn)技術(shù),為探索無(wú)瘢痕愈合的分子機(jī)制提供可靠的前期鋪墊.由實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到以下結(jié)論:1.建立了穩(wěn)定可靠的胎兔皮膚切割傷動(dòng)物模型2.使用改進(jìn)的異硫氰酸胍一步法由皮膚組織中獲得滿意的核酸3.根據(jù)實(shí)驗(yàn)的特殊性,合理地應(yīng)用并自行改良抑制性消減雜交技術(shù),成功構(gòu)建了胎兔皮膚線性切割傷的差減文庫(kù),在G

2、enBank中注冊(cè)了42條EST并從中篩選出14條尚未報(bào)道的基因片段,這些基因片段與胎兔皮膚的無(wú)瘢痕愈合緊密相關(guān)4.利用組織學(xué)方法發(fā)現(xiàn),創(chuàng)傷與未創(chuàng)傷對(duì)照的胎兔皮膚組織中纖維母細(xì)胞均異常增多,推測(cè)纖維母細(xì)胞在胚胎發(fā)育過(guò)程中具有尚未發(fā)現(xiàn)的其它功能.5.原位雜交顯示,創(chuàng)傷后胎兔皮膚中纖維母細(xì)胞大量表達(dá)我們?cè)诓顪p文庫(kù)中篩選的基因片段BU581985,說(shuō)明該基因片段在無(wú)瘢痕愈合時(shí)具有重要的作用,同時(shí)也印證了胎兒纖維母細(xì)胞在無(wú)瘢痕愈合過(guò)程中為主要效