滋補(bǔ)脾陰方藥對(duì)谷氨酸損傷神經(jīng)元中樹(shù)突棘的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河^察滋補(bǔ)脾陰方藥預(yù)處理對(duì)于谷氨酸引起的原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元樹(shù)突棘形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷的保護(hù)作用，探討滋補(bǔ)脾陰方藥對(duì)于樹(shù)突棘內(nèi)與其形態(tài)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定密切相關(guān)的SNK-SPAR途徑的調(diào)節(jié)作用，從而深入探討其相應(yīng)的神經(jīng)保護(hù)作用及其與樹(shù)突棘形態(tài)調(diào)節(jié)之間的相關(guān)分子機(jī)制。 研究方法：將增強(qiáng)的綠色熒光蛋白表達(dá)載體(pEGFP-N2)通過(guò)陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染至原代培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元內(nèi)，用谷氨酸處理細(xì)胞，通過(guò)熒光顯微鏡觀察樹(shù)突棘的形態(tài)結(jié)構(gòu)的

2、變化情況；免疫熒光細(xì)胞化學(xué)方法觀察與樹(shù)突棘形態(tài)相關(guān)的分子SNK、SPAR在谷氨酸處理后的表達(dá)變化情況，并觀察在使用滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)處理后對(duì)SPAR和SNK表達(dá)變化的調(diào)節(jié)作用。 研究結(jié)果：谷氨酸對(duì)原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元的樹(shù)突棘結(jié)構(gòu)有明顯的損傷作用：表現(xiàn)在樹(shù)突干斷裂，樹(shù)突棘呈靜脈曲張樣改變，樹(shù)突棘結(jié)構(gòu)的退化、消失等；谷氨酸可以引起血清誘導(dǎo)激酶SNK蛋白表達(dá)上調(diào)，并引起樹(shù)突棘內(nèi)肌動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)蛋白SPAR蛋白表達(dá)下調(diào)并在細(xì)胞內(nèi)重新分布

3、，滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)處理能夠明顯抑制SNK和SPAR的蛋白表達(dá)變化，改善谷氨酸對(duì)樹(shù)突棘結(jié)構(gòu)的損傷情況。 研究結(jié)論： 1.谷氨酸對(duì)原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元樹(shù)突棘的損傷機(jī)制可能在于調(diào)節(jié)突觸后與樹(shù)突棘結(jié)構(gòu)穩(wěn)定密切相關(guān)的SNK-SPAR途徑； 2.谷氨酸對(duì)原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元樹(shù)突棘的損傷可能與谷氨酸引起SPAR在細(xì)胞內(nèi)的重新分布有關(guān)； 3.滋補(bǔ)脾陰方藥具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用，其神經(jīng)保護(hù)作用的實(shí)現(xiàn)與維持樹(shù)突棘正常的形