抗山羊IFn-γ單抗的制備及鑒定.pdf

1、T細(xì)胞、NK細(xì)胞活化后，會產(chǎn)生干擾素-γ（IFN-γ），IFN-γ能夠增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的殺傷活性，具有抗病毒感染、抗腫瘤等生物學(xué)活性。血液和炎癥部位IFN-γ含量的變化可作為評估機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)。目前未見有山羊IFN-γ單抗的研究報(bào)道，也未見相關(guān)的試劑盒。為制備山羊IFN-γ單克隆抗體，本研究以重組的山羊IFN-γ融合蛋白為抗原免疫BALB/c小鼠，通過常規(guī)細(xì)胞融合等單克隆抗體制備技術(shù)，篩選IFN-γ單抗雜交瘤，對IF

2、N-γ單抗的特異性和亞型進(jìn)行鑒定。研究結(jié)果如下:
　　1.免疫的3只BALB/c小鼠血清抗體效價(jià)均達(dá)到1∶105。
　　2.對融合的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得了1株能夠分泌IFN-γ單抗的雜交瘤細(xì)胞株（命名為3C），雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)上清中抗體效價(jià)為1∶103，制備小鼠腹水后，測得抗體效價(jià)為1∶106。
　　3.IFN-γ單克隆抗體的類別為IgG1，κ型。
　　4.在Western blot試驗(yàn)中，IFN-γ單克隆抗