抑制C35基因表達(dá)介導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡及相關(guān)信號(hào)通路的研究.pdf

1、山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文抑制C35基因表達(dá)介導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡及相關(guān)信號(hào)通路的研究姓名：劉俏俏申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病原生物學(xué)指導(dǎo)教師：閆歌20090401山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文psiRNA—C35—2組的相對(duì)表達(dá)率分別是轉(zhuǎn)染對(duì)照組(脂質(zhì)體組)的953％、40％和284％；Westernblot結(jié)果顯示，以轉(zhuǎn)染脂質(zhì)體組的蛋白帶為標(biāo)準(zhǔn)，其它組與之比較，轉(zhuǎn)染質(zhì)粒pTZU6I、psiRNAC351和psiRNAC352組的相對(duì)表達(dá)率

2、分別是轉(zhuǎn)染對(duì)照組(脂質(zhì)體組)的949％、296％和322％。通過RTPCR和Westernblot檢測到重組質(zhì)粒psiRNAC351和psiRNAC352能夠明顯抑制C35基因表達(dá)。通過MTT法檢測細(xì)胞增殖情況，結(jié)果表明重組質(zhì)粒能夠抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖。采用AnnexinV法進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染pTZU6I和脂質(zhì)體組的凋亡為216％和185％，而轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒的分別為337％和449％。應(yīng)用Tunel檢測siRNA作用后腫瘤細(xì)胞

3、的凋亡變化，結(jié)果顯示siRNA作用的實(shí)驗(yàn)組腫瘤細(xì)胞的凋亡細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照組，說明抑制C35基因表達(dá)能明顯介導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞的凋亡。應(yīng)用Westernblot檢測C35基因作用后相關(guān)信號(hào)分子變化，結(jié)果顯示，單獨(dú)轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒psiRNA—C35的乳腺癌細(xì)胞中Caspase3表達(dá)明顯強(qiáng)于對(duì)照組，說明抑制C35基因表達(dá)可激活信號(hào)分子Caspase3，進(jìn)而激活Caspase細(xì)胞凋亡信號(hào)通路，初步探討了C35基因在乳腺癌細(xì)胞中的作用機(jī)制?？傊狙芯?/p>